Avances en la investigación láctea
Acceso abierto

abstracto

Comparaciones transcriptómicas de células Mac-T versus tejido mamario durante el embarazo tardío y la lactancia máxima

Afshin Hosseini, Rekha Sharma, Massimo Bionaz y Juan J Loor

Los cultivos de células epiteliales, incluidas las células inmortalizadas, se han utilizado ampliamente para ayudar a responder preguntas básicas de la fisiología de las glándulas mamarias en condiciones normales o enfermas. La utilidad de usar cultivo celular depende del grado de identificación en comparación con el epitelio mamario in vivo. Nuestro objetivo fue comparar el transcriptoma por medio de microarray y qPCR de células epiteliales mamarias bovinas inmortalizadas (Mac-T) cultivadas en plástico (es decir, sistema bidimensional) versus tejido mamario obtenido durante el embarazo tardío (-30 DIM) y pico. lactancia (+60 DIM). El análisis funcional de los datos de micromatrices se realizó utilizando herramientas de análisis de enriquecimiento y el enfoque de impacto dinámico (DIA). En general, entre el 37 % (frente a +60 DIM) y el 44 % (frente a -30 DIM) de los genes anotados medidos se consideraron expresados diferencialmente (DEG) entre las células Mac-T y el tejido mamario. Estos datos, junto con los resultados bioinformáticos de los genes expresados de forma no diferencial, indicaron una mayor similitud general entre las células Mac-T y el tejido mamario lactante que el tejido mamario no lactante. Sin embargo, las células Mac-T tenían una menor expresión medida por qPCR de genes implicados en la síntesis de leche en comparación con el tejido mamario. El análisis funcional de DEG apoyó aún más el fenotipo de lactancia deficiente de las células Mac-T en comparación con el tejido mamario. Los análisis bioinformáticos de DEG sugirieron que las células Mac-T cultivadas en plástico tenían una mayor dependencia de la glucosa, los aminoácidos y los ácidos grasos para la producción de energía, mayores interacciones de célula a célula y más propensas a reaccionar a los mediadores inflamatorios en relación con los mamarios. tejido. A pesar de estas diferencias, los datos sugieren que las células Mac-T podrían ser adecuadas para estudiar la regulación de las proteínas de la leche. Para los estudios de regulación de la grasa de la leche, las células Mac-T podrían no ser tan sensibles como el tejido mamario, particularmente por su menor expresión de PPARG y menor inducción de vías relacionadas con PPARγ y LXR. En general, este estudio reveló una marcada diferencia en las firmas del transcriptoma entre el tejido mamario y las células Mac-T cultivadas en plástico.