ISSN: 2167-0412
Surjeet Singh Bisht, Anand Singh Bisht y Rajendar Singh Chauhan
El estudio se centra en establecer una Picrohiza kurroa Royle ex Benth mejorada, tolerante a la sal y la sequía, una planta medicinal en peligro de extinción del Himalaya occidental a través de un sistema de mutagénesis junto con ensayos in vitro técnica de regeneración. La regeneración usando hojas como explantes de plantas maduras de germoplasma caracterizado es beneficiosa porque la planta de origen no se daña. Se logró una formación eficiente de callos, es decir, el 85 % en medio MS modificado a 2,4-D a 3,5 mg L-1. Se usó metano sulfonato de etilo (EMS), un mutágeno químico, para inducir la mutación en la biomasa del callo en condiciones in vitro. Se observaron disminuciones relativas en la biomasa del callo a medida que la dosis del producto químico mutagénico aumentaba de 0,0 a 0,8 mM. La selección de líneas de callos mutantes también se investigó frente al nivel de tolerancia a la sal (NaCl) y la sequía (manitol) utilizando sus diversas concentraciones, es decir, 50 a 250 mM L-1. En el callo mutagenizado (MC) bajo ambas respuestas de estrés hubo un aumento en la biomasa del callo con el aumento sucesivo en la concentración de NaCl y Manitol hasta 100 mM L-1, luego de eso comenzó a declinar. La línea de callos mutantes tolerados por estrés también se caracterizó por la acumulación de contenido de prolina y glicina betaína (GB). A concentraciones de 100 mM L-1 de NaCl y manitol, se acumuló un mayor contenido de prolina y GB en el callo mutagenizado, es decir, 5,23 y 5,18 µmol g-1 FW y 11,23 y 11,98 µg g-1 FW respectivamente, lo que es significativamente mayor en comparación con el callo no mutagenizado (UM). Para la proliferación de brotes en la línea de callos mutantes, se usaron varias concentraciones con combinación de reguladores de crecimiento vegetal (PGR) en los tratamientos (T1, T2 y T3). Invariablemente, en el tratamiento T3 la concentración de 1,0+0,5 mg L-1 resultó en la mayor regeneración de brotes, es decir, 85 %, mientras que en T1 se obtuvo un mínimo de 20 % a la concentración de 0,5+0,1 mg L-1. Se encontró que el medio MS fortificado con NAA era superior a IAA e IBA con respecto a la inducción de raíces. Se evaluó el rendimiento agronómico ex situ del mutante y el estrés seleccionados cultivados a través de la ingeniería de tejidos en condiciones salinas y de sequía durante 30 días. En ambas condiciones de estrés, la planta mutante mostró un aumento notable en todos los parámetros estudiados, es decir, longitud de raíces y brotes, raíces frescas y secas, biomasa de brotes y número de hojas con respecto a la planta normal (control).