Avances en la investigación láctea
Acceso abierto

abstracto

ELISA para leche cruda y tratada térmicamente de vaca y búfala en la leche de otras especies y fuentes

Willem Haasnoot, Nermin Sajic, Karen Doorn Essers, Lucia Streppel y Ron Verheijen

Debido a los precios más bajos de la leche de vaca y búfala, la mezcla fraudulenta con leche de otras especies de mayor precio y fuentes es económicamente atractivo pero ilegal y peligroso para los consumidores alérgicos. Para la detección rápida de la leche de vaca, se dispone de varios inmunoensayos, pero la mayoría carece de la posibilidad de detectar la leche de vaca tratada térmicamente debido a la desnaturalización de la(s) proteína(s) diana. En el presente ensayo indirecto de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA), un anticuerpo monoclonal de ratón (Mab) producido contra la proteína de leche bovina ĸ-caseína se marca con la enzima peroxidasa de rábano picante y se une a los pocillos recubiertos con ĸ-caseína bovina de un La placa de microtitulación de 96 pocillos es inhibida por la caseína ĸ bovina libre en la muestra o el estándar. El Mab reconoce un epítopo que contiene 5 aminoácidos en la parte del glicomacropéptido (GMP) de la ĸ-caseína bovina que está ausente en la ĸ-caseína de cabra, oveja, caballo, burro, camello, etc., pero está presente en la ĸ-caseína de búfalo. Debido al formato de ensayo indirecto, el ELISA de leche de vaca y búfala también reconoce la leche tratada térmicamente que contiene ĸ-caseína desnaturalizada. El rango de medición de los patrones de calibración de ĸ-caseína bovina es de 0,1 a 2,5 µg/ml, el límite de detección es de 0,05 µg/ml y la única preparación de la muestra de leche necesaria es la dilución (100 o 1000 veces). Este nuevo ELISA rápido y fácil de aplicar es muy adecuado para la detección de leche cruda y calentada de vacas y búfalos de menor precio en la leche de mayor precio de otras especies y fuentes dentro del rango de 0,25 a 50 %.