ISSN: 0974-276X
Aarthi Narayanan, Weidong Zhou, Mark Ross, Jane Tang, Lance Liotta, Emanuel Petricoin, Fatah Kashanchi, Charles Bailey y Serguei Popov
Un nuevo enfoque basado en espectrometría de masas (MS) para la identificación de biomarcadores derivados del huésped (BM) en La fracción circulante de baja masa molecular (LMM) (<25 kDa) del proteoma sanguíneo se analizó en un modelo murino. Ratones DBA2/J fueron desafiados intraperitonialmente con esporas de la cepa toxigénica B. anthracis Sterne (pXO1 + , pXO2 - ) que es virulenta en ratones DBA/2 o la cepa delta Sterne no toxigénica y no virulenta (pXO 1 - , pXO2 - ). Las muestras de suero se obtuvieron en múltiples puntos de tiempo y se separaron mediante electroforesis en gel desnaturalizante de flujo continuo seguida de tinción de Coomassie para aislar el archivo LMM para la posterior identificación de MS. Los fragmentos de péptidos derivados de más de 200 proteínas mostraron abundancias diferenciales de baja varianza entre desafíos letales y no letales. Varias proteínas del análisis de MS se sometieron a verificación secundaria mediante transferencias Western. Las abundancias séricas de 6 proteínas (anhidrasa carbónica 2, adenilato quinasa 1, peroxirredoxina 2, UMP-CMP quinasa, sustrato 1 de C3 botulínica relacionado con Ras y destrina) de un total de 10 proteínas analizadas coincidieron fuertemente con enfermedades de ántrax establecidas. e y la mortalidad, lo que los convierte en candidatos potenciales para BM asociados con la enfermedad del ántrax derivada del huésped. Se demostró que estos BM eran “elásticos” en que sus niveles de abundancia en sueros de ratones tratados con doxiciclina respondieron a la intervención terapéutica, lo que los convirtió en herramientas útiles para monitorear las eficacias de los regímenes de tratamiento nuevos y existentes.