ISSN: 2167-0412
Waraporn Putalun, Hiroyuki Tanaka, Seiichi Sakamoto y Yukihiro Shoyama
Se construyó un anticuerpo variable de fragmento de cadena única recombinante (scFv) a partir de líneas celulares de hibridoma que expresan anticuerpo monoclonal (MAb) anti-solamargina (As). ). Las características de la proteína As-scFv, expresada tanto en Escherichia coli recombinante como en la raíz pilosa, eran casi las mismas que las del MAb original. Se produjeron hasta 220 ng de As-scFv recombinante por miligramo de proteína soluble en cultivos transgénicos de raíces peludas de S. khasianum. La concentración de glucósidos de solasodina fue 2,3 veces mayor en el transgénico que en la raíz peluda de tipo salvaje, lo que se refleja en el nivel de As-scFv soluble. La planta de S. khasianum recombinante regenerada a partir de raíces peludas recombinantes contenía una concentración de glucósido de solasodina 2,3 veces superior a la de la planta regenerada a partir de raíces peludas de tipo salvaje. Estos resultados sugirieron que el anticuerpo scFv expresado en la planta transgénica controlaba el nivel de antígeno. Esta metodología es el primer éxito para el mejoramiento molecular de metabolitos secundarios, sin comprender la enzima biosintética.