Revista de Nutrición y Ciencias de la Alimentación
Acceso abierto

abstracto

El procesamiento de SREBP-2 mediado por JNK por Genistein regula al alza LDLR Expresión en células HepG2

Seung-Min Lee, Hye Won Han y Yunhye Kim

La genisteína ha sido implicada por sus efectos antiaterogénicos. Investigamos los mecanismos moleculares detrás del impacto de la genisteína en la expresión de LDLR, el receptor del colesterol LDL y las vías de señalización relacionadas en las células HepG2. La genisteína aumentó los niveles de ARNm y proteína de LDLR de manera dependiente del tiempo. Con el fin de averiguar los efectos de la genisteína en los niveles transcripcionales, se construyó una construcción indicadora de luciferasa que contenía el promotor LDLR (pLDLR-luc) y se examinó su respuesta a la genisteína. La genisteína aumentó la actividad informadora pero no logró aumentar la actividad transcripcional cuando se eliminó el elemento regulador de esteroles (SRE) en el promotor LDLR. La genisteína aumentó la translocación nuclear de SREBP-2 y la actividad de unión al ADN de SREBP-2 al promotor de LDLR mediante el ensayo de inmunoprecipitación de cromatina (CHIP). El tratamiento previo con fluoruro de 4-(2-aminoetil) bencenosulfonilo (AEBSF), inhibidor de la serina proteasa, evitó los efectos de la genisteína, mientras que la brefeldina A, que causa la fusión del retículo endoplasmático (ER) y el aparato de Golgi, no lo hizo, lo que sugiere que la genisteína puede tienen un efecto sobre el tráfico de SREBP-2 desde el RE hasta el aparato de Golgi. Los niveles de proteína Insig-1 no cambiaron con la genisteína. Entre las proteínas quinasas activadas por mitógenos (MAPK), la genisteína fosforilaba las señales de JNK pero no de p38 y ERK. El inhibidor de JNK (SP600126) eliminó los niveles de LDLR y SREBP-2 nuclear estimulados por genisteína. Para minimizar los efectos de c-Jun, un factor de transcripción activado por señales JNK, se construyó una construcción de luciferasa LDLR truncada que contenía SRE pero carecía del sitio de unión putativo de c-jun. La genisteína aún podía potenciar la actividad transcripcional del constructo LDLR truncado. Todos los efectos de la genisteína fueron abolidos por la adición de colesterol. En conclusión, la genisteína tiene efectos antiaterogénicos al activar las señales JNK y el procesamiento de SREBP-2, seguido de una regulación positiva de LDLR. Sin embargo, los efectos beneficiosos de la genisteína podrían verse afectados por la cantidad de colesterol celular.