Química orgánica: investigación actual
Acceso abierto

abstracto

Síntesis in vitro de diez almidones mediante la sintasa de almidón de patata y la enzima ramificadora de almidón que dan diferentes proporciones de amilopectina y amilosa

Mukerjea R, Sheets RL, Grey AN y Robyt JF

Los objetivos de este estudio fueron el uso de dos enzimas altamente purificadas, la sintasa de almidón de patata (SS ) y Starch-Branching-Enzyme (SBE) para obtener in vitro las síntesis de diez almidones, con diferentes proporciones de amilopectina y amilosa. La amilosa se sintetizó primero por la reacción de SS con ADP [14C] Glc para dar diez amilosas idénticas; la amilopectina luego se sintetizó por la acción de SBE para dar diez almidones con diferentes cantidades de amilopectina. Dos de las amilosas 14C se hicieron reaccionar con 1,0 mUI de enzima ramificadora de almidón (SBE) purificada durante 75 y 130 segundos, respectivamente. En una segunda síntesis, 3 de las amilosas se esterilizaron en autoclave y reaccionaron con 1,0 mUI durante 15, 45 y 75 segundos. En la tercera síntesis, se hicieron reaccionar 5 amilosas con diferentes cantidades de SBE de 0,50 a 0,01 mIU durante 130 segundos cada una. Los 10 almidones sintetizados se separaron en fracciones de amilopectina y amilosa. Las proporciones de amilopectina y amilosa oscilaron entre 99,9 % de amilopectina y 0,1 % de amilosa y 10 % de amilopectina y 90 % de amilosa. Los resultados muestran que se sintetizaron 10 almidones diferentes, utilizando solo dos enzimas, SS y SBE. No hubo cebadores involucrados. El glucógeno y las enzimas desramificadoras tampoco estuvieron involucradas.