ISSN: 2375-4508
Er-Dan Wang, Seok-Hwan Song, A-Na Ha, Sang-Ryeul Lee, Kyeong-Lim Lee, Jae-Ik Lee, Zhongde Wang, Xian-Feng Yu, Wen-Fa Lv e Il-Keun Kong
La complementación tetraploide se ha utilizado para mejorar la producción de animales clonados. El objetivo principal de este estudio fue mejorar la eficiencia de la producción de embriones tetraploides bovinos y el potencial de desarrollo de embriones tetraploides bovinos en blastocistos. Evaluamos el tiempo de escisión embrionaria temprana y establecimos la cantidad de tiempo definida para recolectar embriones bovinos sincrónicos en etapa de 2 células para electrofusión. También se probaron diferentes protocolos de electrofusión. El segundo objetivo era controlar la transición de la ploidía mediante visualización de fluorescencia para arrojar luz sobre el proceso de fusión nuclear de los embriones bovinos en etapa de dos células fusionadas con membrana citoplasmática. Los cariotipos de los blastocistos del día 8 (día 0: día de la electrofusión) se determinaron mediante análisis de cariotipo. Descubrimos que la electrofusión de embriones bovinos en etapa de 2 células producidos in vitro da como resultado embriones tanto tetraploides como diploides y que las tasas de formación de blastocistos a partir de embriones en etapa de 2 células fusionados se ven afectadas por el número de pulsos de electrofusión y el momento en que la 2- los embriones en etapa celular se forman después de la inseminación. Identificamos dos configuraciones nucleares distintas después de la electrofusión de embriones en etapa de 2 células, cada una de las cuales está relacionada únicamente con la formación de embriones tetraploides o diploides. En base a la observación de que los embriones tetraploides y diploides derivados de embriones en etapa de 2 células fusionados se someten a diferentes tiempos para volver a convertirse en embriones en etapa de 2 células, los embriones de 2 células diploides y tetraploides se pueden separar fácilmente después de la electrofusión. Finalmente, nuestro estudio estableció un protocolo experimental para la producción efectiva de embriones tetraploides bovinos por electrofusión de embriones de 2 células.