Ingeniería enzimática
Acceso abierto

abstracto

Actividad citotóxica de péptidos derivados de Parasporin 2Aa1 y sus análogos contra células SW480 de cáncer de colon

Jennifer Cruz

La parasporina-2 (PS2Aa1) es una toxina producida por Bacillus thuringiensis y ha mostrado una alta citotoxicidad contra líneas celulares de cáncer como: MOLT-4, Jurkat, Sawano y HepG2. En consecuencia, para explicar su efecto citotóxico, se ha propuesto un modelo de mecanismo de varios pasos: en primer lugar, PS2Aa1 se uniría a los receptores anclados a GPI u otras proteínas en la membrana; luego, las toxinas concentradas se oligomerizan, luego de eso, se forman poros transmembrana, generando daño en la permeabilidad de la membrana (1). Sin embargo, su mecanismo de acción no ha sido dilucidado en absoluto. Por ello, en este trabajo de investigación llevamos a cabo una fragmentación de PS2Aa1, sintetizando péptidos, mediante una estrategia Fmoc. Obtuvimos 3 péptidos derivados de diferentes dominios del PS2Aa1 denominados: P264-G274, Loop1-PS2Aa y Loop2-PS2Aa. Además, se obtuvieron 3 derivados de P264-G274 (P264-V268K, P264-V268W y P264-V268H), 1 derivado de Loop1-PS2Aa (Loop1-Y5K) y 1 derivado de Loop2-PS2Aa (Loop2-N4W). Los cambios en cada residuo fueron respaldados por un aumento en la carga y la hidrofobicidad de los compuestos. Se confirmaron las estructuras secundarias de los péptidos. por espectros de dicroísmo circular (DC). Todos los péptidos de PS2Aa1 exhibieron una estructura secundaria de α-hélice con una banda de absorción máxima a 190 nm y dos bandas de absorción mínima entre 205-220 nm. Además, se determinó el grado de hemólisis de los eritrocitos humanos mostrando que todos los péptidos evaluados tenían un HC₅₀ inferior a 100 µM, con menos del 24% de hemólisis con respecto al control positivo (TX- 100 0,1%). Finalmente, los péptidos completos exhibieron actividad contra SW480; destacando que P264-V268K fue el más activo con un IC₅₀ de 5.716 μM. El 5-fluorouracilo, medicamento de quimioterapia, se tomó como control positivo. Estos resultados demuestran claramente que P264-V268K tiene una gran capacidad en el tratamiento de células de cáncer de colon SW480 con un modo de acción seguro, selectivo y probablemente nuevo.< /p>