Revista de glucómica y lipidómica
Acceso abierto

abstracto

Clonación, expresión recombinante en Escherichia coli y propiedades de unión al ADN de Datura metel L. Factor de transcripción Myb

Priya Arora

Las proteínas MYB son una superfamilia de factores de transcripción que desempeñan funciones importantes en los procesos relacionados con el desarrollo y la defensa en las plantas. La familia MYB se caracteriza por la presencia de un dominio de unión al ADN conservado llamado dominio MYB, que normalmente contiene dos o tres secuencias repetidas imperfectas. En el presente estudio, reportamos las propiedades de clonación, expresión y unión al ADN del factor de transcripción Myb de Datura metel L. Se detectó un marco de lectura abierto de 856 pb que podría codificar una proteína de 278 residuos de aminoácidos. El ADNc que codifica DmMyb se clonó en el vector de expresión pRSETA y se expresó heterólogamente en E.coli. El DmMyb expresado como proteína de fusión etiquetada con histidina se purificó mediante cromatografía de afinidad Ni-NTA. Además, se evaluó la capacidad de la proteína DmMYB recombinante parcialmente purificada para unirse a MBCE (elementos cis de unión a Myb) con cinco elementos conocidos que actúan en cis específicos de Myb (MSCE 1, MSCE 2, MSCE 3, MSCE 4 y MSCE 5) usando el ensayo de cambio de movilidad electroforética (EMSA). El ensayo de unión indicó que el DmMyb recombinante parcialmente purificado interactúa con tres elementos que actúan en cis específicos de Myb (MBCE 3, MBCE 4 y MBCE 5). Se requieren más estudios para proporcionar conocimientos profundos sobre la regulación transcripcional de los genes/redes de genes Datura metel que están asociados con el factor de transcripción DmMyb