Revista de ciencia y terapia celular
Acceso abierto

abstracto

Caracterización de la estrategia de administración de genes de lipofección facilitada por albúmina sérica humana

Robert W. Arpke y Pi-Wan Cheng

Presentamos la caracterización de una estrategia de lipofección facilitada, que emplea una formulación preparada con albúmina sérica humana, DMRIE-C y pCMV?. Se caracterizó el tamaño de los complejos de transfección en la formulación de lipofección que contenía albúmina mediante dispersión de luz, tráfico intracelular mediante microscopía confocal y mecanismo de captación mediante inhibidores. ¿Suplementación de la formulación de DMRIE-C más pCMV? con albúmina mejora la eficacia de la lipofección 8-9 veces y el tamaño de los complejos 2-2,5 veces medido por dispersión de luz. El análisis del tráfico intracelular de los complejos de transfección por microscopía confocal revela colocalización de ADN y albúmina en el citoplasma y el núcleo. El pretratamiento de las células con clorpromazina o exceso de albúmina, citocalasina B o complejos de filipina da como resultado la inhibición de la eficiencia de transfección en un 20 %, 55 % o ninguno, respectivamente. Los resultados sugieren una participación moderada de la clatrina, una participación significativa de la macropinocitosis asociada a actinas y ninguna participación de las caveolas en la captación de los complejos de transfección preparados con albúmina sérica humana, DMRIE-C y pCMV?.