Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Una nueva solución de O-ftaldialdehído (OPA) para la detección de grupos amina por HPLC de fluorescencia sin preparación de ácido bórico

Gilberto Joao Padovan, Izabel Arruda Leme, Priscila Giacomo Fassini, Nelson Iucif Junior y Julio Sergio Marchini

Tradicionalmente, el o-ftaldialdehído (OPA) se prepara con tampón de borato para reacciones antes y después de la columna. El objetivo de este estudio fue demostrar que la preparación de OPA para la detección de grupos amina por HPLC utilizando agua alcalinizada (pH 10,4), en lugar de ácido bórico, es metodológicamente factible, arrojando resultados similares a los obtenidos con ácido bórico. Este procedimiento puede eliminar la eventual precipitación del sistema de línea, como en el detector de cubeta y en la línea de tubería después de la "T" conexión. Otra característica importante de este procedimiento es que elimina el riesgo potencial de intoxicación por bórax entre los usuarios. La sensibilidad de la señal de detección no cambió en absoluto. Se usó poliamina estándar y amina biogénica tanto para las preparaciones de OPA como para el análisis de HPLC. El coeficiente de correlación (r) fue de 0,97 y la recuperación ~ 90 % para las preparaciones de tampón de agua y borato. El coeficiente de variabilidad (CV) entre ensayos para los procedimientos con agua y borato osciló entre 7,9 y 15,2 % y el CV intraensayo osciló entre 1,8 y 5,9 %. En consecuencia, el agua puede reemplazar al ácido bórico con ventaja en el proceso OPA. Por lo tanto, el uso de agua en lugar de ácido bórico en la preparación de OPA da como resultado una menor contaminación de residuos ambientales por los detritos de HPLC, además de eliminar el riesgo futuro de intoxicación por ácido bórico.