A. Barbati, L. Cesarini, R. Pellegrino, G.C. Di Renzo, Chia Grenelli
Objetivo: La medición de Cistatina C urinaria (quiste-C) puede ser una muy buena manera de identificar tempranamente a los recién nacidos
predispuestos al deterioro de la función renal. PETIA, PENIA y EIA son los métodos inmunométricos utilizados para
determinación cuantitativa de quiste-C en fluido biológico humano pero tienen alguna interferencia y no permiten
realizando análisis cualitativos. El presente estudio realiza una validación de Immunoblot SDS-PAGE para el análisis de
quiste urinario-C.
Métodos: se recolectaron orinas de neonatos de la enfermería del Hospital S. Maria della Misericordia. Quiste urinario-C
fue investigado por la electroforesis SDS-PAGE, el inmunoblot y la lectura de la densidad óptica.
Resultados: el análisis cualitativo mostró dos formas moleculares diferentes: una reactividad de alrededor de 70 KDa en todas las muestras y
una reactividad a 13 KDa en un número limitado de muestras.
El coeficiente de variación para la precisión del ensayo fue del 10 % y para la precisión del ensayo fue de ± 10%; el límite de detección era
0,009 ng/ µL y la curva de calibración tiene una buena linealidad (rango 0,02-0,3 ng/ µL). La estabilidad del quiste urinario-C
era aceptable, incluso sin el uso de inhibidores de la proteasa, si el ensayo se realizaba en orina recién recolectada o
inmediatamente después de descongelar las muestras, almacenadas hasta por seis meses.
Conclusión: El análisis SDS-PAGE de inmunotransferencia es un método válido para obtener un análisis cualitativo y cuantitativo de
quiste urinario-C.