Ardin Marius OUAYOUE NOUTONG
Declaración del problema: Los métodos actuales de diagnóstico de la malaria requieren la extracción de sangre para detectar el parásito. La extracción de sangre requiere personal capacitado y aumenta el riesgo de enfermedades infecciosas transmitidas por la sangre. El muestreo no invasivo mejorará en gran medida el diagnóstico de malaria en áreas remotas. La saliva está fácilmente disponible y es fácil de recolectar, pero hasta ahora no ha recibido mucha atención. Los métodos moleculares como la PCR muestran un gran beneficio usando saliva. Pero el largo tiempo de respuesta, el alto costo y la disponibilidad solo en laboratorios bien equipados hacen que esta técnica sea inadecuada para el diagnóstico de rutina. Recientemente, se desarrolló una técnica molecular nueva, rápida, simple y sensible denominada amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP). El propósito de este estudio es evaluar la precisión de los métodos de diagnóstico molecular rápido basados en la saliva, en particular LAMP y LAMP en tiempo real, en comparación con la PCR. Metodología & Orientación Teórica:Las muestras de saliva y sangre se recolectaron y analizaron mediante PCR anidada, LAMP y LAMP en tiempo real (RT), enfocándose en la secuencia de nucleótidos específica de la especie de el gen del ARN ribosomal de la subunidad pequeña (ARNr 18S) de P. falciparum.
Resultados:< /span>
Cuando se usó PCR anidada con sangre como estándar, se mostró LAMP de saliva y sangre ambas con una sensibilidad del 43,90% y especificidades del 68,75% y 57,62% respectivamente. RT-LAMP en saliva y sangre mostró sensibilidades de 49,38 % y 48,21 % respectivamente y especificidades de 94,11 % y 66,67 % respectivamente. Cuando se comparó con Saliva PCR como estándar, Saliva-LAMP y Saliva-RT-LAMP mostraron sensibilidades del 70,23 % y 73,49 % respectivamente y especificidades del 62,5 % y 76,47 % respectivamente.
Conclusión & Importancia:
Las tecnologías LAMP y Real Time LAMP coinciden con las recomendaciones de la OMS para una prueba de diagnóstico ideal para los países en desarrollo. Teniendo en cuenta la adaptabilidad de campo de la tecnología LAMP y la facilidad del muestreo de saliva, vale la pena seguir investigando el método para optimizar mejor los protocolos para la detección de ADN de parásitos.