Jornal de Pesquisa em Dermatologia Clínica e Experimental
Acceso abierto

abstracto

Regulación ascendente de 14-3-3σ en Hacat sobre co-cultivo con HEPM

Gabriel Magnucki, Joanna Białek, Kathrin Hammje, Hanna Prenzel, Gunter Klohs, Johannes Wohlrab, Cuong Hoang-Vu y Rainer Finke

Antecedentes: Para generar un sistema in vitro de la interacción dérmica epitelial-mesenquimatosa coâÂ& #8364;‘HaCaT (queratinocitos) y HEPM (mesénquima embrionario) cultivados. Este modelo permitió una disyunción local con comunicación célula-célula preservada.

Métodos: Para el análisis de diferentes patrones de expresión de proteínas entre HaCaT de cultivo puro y cocultivo, realizamos electroforesis 2D y espectrometría de masas. Posteriormente, la proteína identificada por espectrometría de masas 14-3-3σ fue silenciado por siRNA en células HaCaT.

Resultados: Analizamos 28 puntos y encontramos 17 proteínas diferentes expresadas principalmente metabólicas y del citoesqueleto. Curiosamente, la estratifina (14-3-3σ), la maspina y la profilina-1 (PFN1) aumentaron, mientras que la peroxirredoxina-5 (PRDX5), la PDZ y la proteína de dominio LIM-1 (CLIM1) y La anexina A1 (ANXA1) disminuyó en los HaCaT cocultivados. La caída específica de 14-3-3σ resultó en una regulación a la baja de RhoA, Rac1/2/3, LIMK1 y cofilina fosforilada, que están involucradas en la dinámica del citoesqueleto. Además, la reducción de 14-3-3σ coincidió con una disminución significativa de las tasas de proliferación y los niveles de Ki67.

Conclusiones: Concluimos que la interacción con las células mesenquimales puede iniciar la alternancia de células precursoras epidérmicas a queratinocitos diferenciados, lo que fue confirmado por la sobrerregulación de diferentes queratinas. Además, 14-3-3σ puede influir en la tasa de proliferación de los queratinocitos a través de Rho GTPasas.