Revista de Inmunología Clínica y Celular
Acceso abierto

abstracto

Dos familias de CGD con una mutación hipomórfica en el dominio de activación de p67phox

Dirk Roos, Jaap D van Buul, Anton TJ Tool, Juan D Matute, Christophe M Marchal, Bu’Hussain Hayee, M Yavuz Köker, Martin de Boer, Karin van Leeuwen, Anthony W Segal, Edgar Pick y Mary C Dinauer

Antecedentes del estudio: La enfermedad granulomatosa crónica (CGD) es una inmunodeficiencia rara causada por un defecto en la NADPH oxidasa leucocitaria. Esta enzima genera superóxido, que es necesario para la destrucción de bacterias y hongos por parte de los leucocitos fagocíticos. La mayoría de los pacientes con CGD tienen mutaciones en CYBB, el gen ligado al cromosoma X que codifica gp91^phox, la subunidad catalítica de la NADPH oxidasa leucocitaria. Presentamos aquí tres pacientes con EGC autosómica recesiva de dos familias con una mutación homocigota en NCF2, el gen que codifica p67^phox, la subunidad activadora de la NADPH oxidasa.

Métodos: La actividad de la NADPH oxidasa leucocitaria, la expresión de los componentes de la oxidasa y las secuencias génicas se midieron con métodos estándar. La mutación encontrada en los pacientes’ El gen NCF2 se expresó como Ala202Valp67^phox en células K562 para medir su efecto sobre la actividad de la NADPH oxidasa. Translocación del p67^phox mutado del citosol de los pacientes’ neutrófilos a la membrana plasmática se midió mediante microscopía confocal y mediante transferencia Western después de la purificación de la membrana.

Resultados: La característica excepcional de los pacientes con CGD A67 informados aquí es que la mutación p.Ala202Val en el dominio de activación de p67^phox era claramente hipomórfica: expresión sustancial de Se observó proteína p67^phox y la actividad de NADPH oxidasa en los neutrófilos de los pacientes fue del 20-70% de lo normal, dependiendo del estímulo utilizado para activar las células. El grado de translocación de Ala202Val-p67^phox a la membrana plasmática durante la activación celular también dependía del estímulo. Ala202Val-p67^phox en células K562 mediaba solo alrededor del 3 % de la actividad oxidasa normal en comparación con las células transfectadas con p67^phox de tipo salvaje.

Conclusión: La mutación encontrada en NCF2 es la causa de la disminución de la actividad de la NADPH oxidasa y de los problemas clínicos (leves) de los pacientes. Proponemos que la mutación p.Ala202Val ha cambiado la conformación del dominio de activación de p67^phox, lo que resulta en una activación reducida de gp91^phox.