Informes de enfermedades agudas y crónicas

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Tropical Diseases Conference 2019: Sensitive and specific ELISA for the serological diagnosis of Strongyloides infections – JM Warnecke - EUROIMMUN AG

JM Warnecke

Introducción: El nematodo Strongyloides stercoralis es el agente causal de la estrongiloidiasis, la cual puede manifestarse en humanos con síntomas dermatológicos, pulmonares e intestinales pasando frecuentemente a una enfermedad crónica. El diagnóstico de la infección por Strongyloides stercoralis generalmente se realiza al encontrar larvas del parásito dentro de las caras. La producción de larvas es de órdenes de magnitud menor que, digamos, la producción de huevos de Ancylostoma duodenal, por lo tanto, la sensibilidad de las técnicas convencionales es baja. La sensibilidad aumenta con técnicas específicas, pero aún se puede pasar por alto la infección. La estrongiloidiasis puede ser una infección potencialmente grave en pacientes inmunocomprometidos. Por ello, es deseable el suministro de métodos diagnósticos sensibles y específicos, especialmente en el contexto de pacientes inmunodeprimidos en los que el diagnóstico y tratamiento de la estrongiloidiasis es de suma importancia. Especialmente en pacientes inmunocomprometidos. Este estudio tuvo como objetivo evaluar métodos serológicos y moleculares para el diagnóstico de estrongiloidiasis humana en muestras de pacientes inmunodeprimidos que fueron previamente analizados por métodos parasitológicos. En este estudio, se utilizaron herramientas serológicas y moleculares para diagnosticar. Varios métodos serológicos, como la microscopía de heces y las técnicas de cultivo, carecen de sensibilidad; La detección de ADN ha demostrado resultados reproducibles con alta sensibilidad y especificidad. La detección de anticuerpos séricos se considera un sustituto del diagnóstico. La extracción de ADN se realizó de acuerdo con un método descrito anteriormente 12 . Brevemente, aproximadamente 500 mg de muestras de heces conservadas en etanol al 70% se lavaron dos veces en PBS. El sedimento resultante se utilizó para la extracción de ADN. Evaluamos la precisión de cinco pruebas serológicas diferentes que también utilizan un estándar de referencia compuesto, nematodo ampliamente distribuido en todo el mundo, en áreas donde las malas condiciones higiénicas permiten el mantenimiento de su transmisión. En el huésped humano, la infección se caracteriza por un ciclo autoinfeccioso, que puede conducir al parásito de por vida si no se trata, obtenido mediante la combinación de los resultados de diferentes pruebas. El NIE-LIPS desarrollado recientemente resultó prácticamente 100 % específico, con una sensibilidad >80 % en infecciones por Strongyloides. Aquí, evaluamos el rendimiento analítico de un ELISA anti-Strongyloides IgG completamente único. El sedimento resultante se utilizó para la extracción de ADN. Evaluamos la precisión de cinco pruebas serológicas diferentes que también utilizan un estándar de referencia compuesto, nematodo ampliamente distribuido en todo el mundo, en áreas donde las malas condiciones higiénicas permiten el mantenimiento de su transmisión. En el huésped humano, la infección se caracteriza por un ciclo autoinfeccioso, que puede conducir al parásito de por vida si no se trata, obtenido mediante la combinación de los resultados de diferentes pruebas. El NIE-LIPS desarrollado recientemente resultó prácticamente 100 % específico, con una sensibilidad >80 % en infecciones por Strongyloides. Aquí, evaluamos el rendimiento analítico de un ELISA anti-Strongyloides IgG completamente único. El sedimento resultante se utilizó para la extracción de ADN. Evaluamos la precisión de cinco pruebas serológicas diferentes que también utilizan un estándar de referencia compuesto, nematodo ampliamente distribuido en todo el mundo, en áreas donde las malas condiciones higiénicas permiten el mantenimiento de su transmisión. En el huésped humano, la infección se caracteriza por un ciclo autoinfeccioso, que puede conducir al parásito de por vida si no se trata, obtenido mediante la combinación de los resultados de diferentes pruebas. El NIE-LIPS desarrollado recientemente resultó prácticamente 100 % específico, con una sensibilidad >80 % en infecciones por Strongyloides. Aquí, evaluamos el rendimiento analítico de un ELISA anti-Strongyloides IgG completamente único. nematodo ampliamente distribuido en todo el mundo, en áreas donde las malas condiciones higiénicas permiten el mantenimiento de su transmisión. En el huésped humano, la infección se caracteriza por un ciclo autoinfeccioso, que puede conducir al parásito de por vida si no se trata, obtenido mediante la combinación de los resultados de diferentes pruebas. El NIE-LIPS desarrollado recientemente resultó prácticamente 100 % específico, con una sensibilidad >80 % en infecciones por Strongyloides. Aquí, evaluamos el rendimiento analítico de un ELISA anti-Strongyloides IgG completamente único. nematodo ampliamente distribuido en todo el mundo, en áreas donde las malas condiciones higiénicas permiten el mantenimiento de su transmisión. En el huésped humano, la infección se caracteriza por un ciclo autoinfeccioso, que puede conducir al parásito de por vida si no se trata, obtenido mediante la combinación de los resultados de diferentes pruebas. El NIE-LIPS desarrollado recientemente resultó prácticamente 100 % específico, con una sensibilidad >80 % en infecciones por Strongyloides. Aquí, evaluamos el rendimiento analítico de un ELISA anti-Strongyloides IgG completamente único. El NIE-LIPS desarrollado recientemente resultó prácticamente 100 % específico, con una sensibilidad >80 % en infecciones por Strongyloides. Aquí, evaluamos el rendimiento analítico de un ELISA anti-Strongyloides IgG completamente único. El NIE-LIPS desarrollado recientemente resultó prácticamente 100 % específico, con una sensibilidad >80 % en infecciones por Strongyloides. Aquí, evaluamos el rendimiento analítico de un ELISA anti-Strongyloides IgG completamente único.
Métodos: El ELISA IgG Anti-Strongyloides (Euroimmun AG, Lbeck, Alemania) se basa en antígeno preparado a partir de S. papillosus. La sensibilidad y la especificidad de ELISA se evaluaron idealmente, la prueba debería volverse negativa o mostrar consistentemente una marcada disminución en el título en un tiempo predecible después del tratamiento exitoso. El sustrato de la enzima, ortofenilendiamina con peróxido de hidrógeno al 0,03 % en tampón de citrato fosfato 0,1 mol/l Aunque algunos estudios documentan una disminución del título de anticuerpos después de un tratamiento eficaz, Varios estudios respaldan la idea de que la detección de anticuerpos específicos de parásitos puede ser un complemento útil para el diagnóstico parasitológico de Los métodos inmunológicos de diagnóstico incluyen el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas Aún no se ha definido un valor de corte claro en comparación con el estándar de referencia serológica aplicado en el Instituto de Parasitología de la Universidad de Berna, Suiza. Las pruebas de diagnóstico adecuadas son cruciales tanto para detectar a las personas infectadas por S. stercoralis como para medir laprevalencia de la infección entre las poblaciones. Uno de los principales problemas de S. stercoralis es que su prevalencia generalprobablemente se subestime el panel de sensibilidad compuesto principalmente debido a la falta de sensibilidad de las pruebas basadas en heces que son las evaluaciones más utilizadas para la infección por S. stercoralis. Las pruebas serológicas también son muy útiles, pero su especificidad es variable en sueros positivos para anticuerpos anti-Strongyloides según el ELISA interno de referencia. El panel de especificidad/reactividad cruzada incluyó 39 sueros de control clasificados como negativos para anticuerpos anti-Strongyloides o positivos para anticuerpos contra otros parásitos, incluidas muestras de pacientes con otras infecciones parasitarias (Echinococcus, Filaria, Ascaris, Toxocara, Trichinella, Fasciola, Schistosoma, Trichuris, Amoeba, Leishmania, Plasmodium, multiinfección; n=25), cáncerpacientes (n=5) y donantes de sangre sanos (n=9). Los resultados dudosos se consideraron positivos.
Resultados: Los resultados obtenidos con el ELISA Anti-Strongyloides coincidieron con las pruebas de referencia en el 94,6 % (53/56) de todas las muestras. En el panel de sensibilidad, el ELISA Anti-Strongyloides se compararon los resultados de cada método con los de los métodos parasitológicos y se determinó el grado de concordancia mediante el coeficiente Kappa (k). La significación estadística se fijó en p < 0,05. fue positivo en 16/17 sueros, como una sensibilidad del 94,1%. El suero que arroja resultados discrepantes El diagnóstico de estrongiloidiasis depende de la identificación de larvas en muestras fecales mediante técnicas de concentración o cultivos obtenidos de un paciente con múltiples infecciones. Entre las muestras de control, se encontró positividad en 2/39 casos (un cáncerpaciente y un donante de sangre), resultando en una especificidad del 94,9%.

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