jane mwambu
Este estudio prueba la hipótesis de que la invasión de queratinocitos parcialmente transformados se inicia mediante señales proinvasivas difusibles proporcionadas por fibroblastos específicos de especie. Se construyeron cultivos organotípicos in vitro de mucosa oral humana neoplásica cultivando una línea celular queratinocítica no tumorigénica parcialmente transformada.aislado de una lesión oral humana displásica (DOKECACC94122104) encima de varios tipos de equivalentes de tejido conectivo. Los tejidos cultivados se analizaron por histomorfometría (profundidad y área de invasión: Dinv, Ainv) e inmunohistoquímica. La presencia de fibroblastos humanos en la matriz indujo una invasión local de DOK (Dinv = 95,6 ± 7,1 μm, Ainv = 45,8 ± 3,5%). Se observó una invasión mínima (P < 0,05) cuando DOK creció en matriz de colágeno simple (Dinv = 14,1 ± 2,1 μm, Ainv = 3,7 ± 0,8 %) o matrices que contenían fibroblastos de ratón (Dinv = 11,5 ± 4,0 μm, Ainv = 4,3 ± 1,0 %) o rata (Dinv = 15,6 ± 1,2 μm, Ainv = 6,1 ± 0,5%). En estos cultivos, la invasión local podría ser inducida por la presencia de fibroblastos humanos en una capa inferior de la matriz de colágeno (P < 0. 05) o por medio acondicionado de cultivos organotípicos de DOK en matriz que contiene fibroblastos humanos (P < 0,05) pero no por medio acondicionado de monocultivos de fibroblastos humanos (P > 0,05). La deposición de colágeno IV humano se observó en la interfaz epitelial-matriz solo cuando DOK se comportó de manera invasiva. En conclusión, la invasión de queratinocitos orales parcialmente transformados fue desencadenada por factores difusibles derivados de fibroblastos inducidos por queratinocitos de una manera específica de especie y asociada con la síntesis de novo de colágeno IV. Un número creciente de informes sugiere que los fibroblastos del estroma tumoral contribuyen activamente a la progresión maligna de las neoplasias epiteliales. Se ha demostrado que tanto los fibroblastos asociados con carcinoma normales como los activados mejoran la invasividad in vitro de células escamosas humanas. 05), pero no por medio acondicionado de monocultivos de fibroblastos humanos (P > 0,05). La deposición de colágeno IV humano se observó en la interfaz epitelial-matriz solo cuando DOK se comportó de manera invasiva. En conclusión, la invasión de queratinocitos orales parcialmente transformados fue desencadenada por factores difusibles derivados de fibroblastos inducidos por queratinocitos de una manera específica de especie y asociada con la síntesis de novo de colágeno IV. Un número creciente de informes sugiere que los fibroblastos del estroma tumoral contribuyen activamente a la progresión maligna de las neoplasias epiteliales. Se ha demostrado que tanto los fibroblastos asociados con carcinoma normales como los activados mejoran la invasividad in vitro de células escamosas humanas. 05), pero no por medio acondicionado de monocultivos de fibroblastos humanos (P > 0,05). La deposición de colágeno IV humano se observó en la interfaz epitelial-matriz solo cuando DOK se comportó de manera invasiva. En conclusión, la invasión de queratinocitos orales parcialmente transformados fue desencadenada por factores difusibles derivados de fibroblastos inducidos por queratinocitos de una manera específica de especie y asociada con la síntesis de novo de colágeno IV. Un número creciente de informes sugiere que los fibroblastos del estroma tumoral contribuyen activamente a la progresión maligna de las neoplasias epiteliales. Se ha demostrado que tanto los fibroblastos asociados con carcinoma normales como los activados mejoran la invasividad in vitro de células escamosas humanas. En conclusión, la invasión de queratinocitos orales parcialmente transformados fue desencadenada por factores difusibles derivados de fibroblastos inducidos por queratinocitos de una manera específica de especie y asociada con la síntesis de novo de colágeno IV. Un número creciente de informes sugiere que los fibroblastos del estroma tumoral contribuyen activamente a la progresión maligna de las neoplasias epiteliales. Se ha demostrado que tanto los fibroblastos asociados con carcinoma normales como los activados mejoran la invasividad in vitro de células escamosas humanas. En conclusión, la invasión de queratinocitos orales parcialmente transformados fue desencadenada por factores difusibles derivados de fibroblastos inducidos por queratinocitos de una manera específica de especie y asociada con la síntesis de novo de colágeno IV. Un número creciente de informes sugiere que los fibroblastos del estroma tumoral contribuyen activamente a la progresión maligna de las neoplasias epiteliales. Se ha demostrado que tanto los fibroblastos asociados con carcinoma normales como los activados mejoran la invasividad in vitro de células escamosas humanas. Un número creciente de informes sugiere que los fibroblastos del estroma tumoral contribuyen activamente a la progresión maligna de las neoplasias epiteliales. Se ha demostrado que tanto los fibroblastos asociados con carcinoma normales como los activados mejoran la invasividad in vitro de células escamosas humanas. Un número creciente de informes sugiere que los fibroblastos del estroma tumoral contribuyen activamente a la progresión maligna de las neoplasias epiteliales. Se ha demostrado que tanto los fibroblastos asociados con carcinoma normales como los activados mejoran la invasividad in vitro de células escamosas humanas.líneas celulares de carcinoma (SCC). Varios informes de experimentos realizados en cultivos monocapa han sugerido que este efecto podría atribuirse a factores difusibles sintetizados por fibroblastos. Sin embargo, se ha sugerido recientemente que los resultados de los estudios realizados en modelos de cultivo de células monocapa bidimensionales convencionales son difíciles de extrapolar a la situación in vivo porque no tienen en cuenta los mecanismos mucho más complejos que intervienen en el proceso tridimensional. de cancerdesarrollo e invasividad. Por lo tanto, se necesita más evidencia experimental de modelos organotípicos in vitro más complejos que imiten de cerca la estructura del tejido tridimensional in vivo y las interacciones de célula a célula para identificar los factores específicos relacionados con los fibroblastos de ma. Los queratinocitos Mwambu Jane mwambumj@gmail.com son importantes para la invasividad in vivo de los SCC. Por otro lado, los estudios previos han utilizado líneas celulares completamente transformadas con un fenotipo invasivo in vivo establecido. Aún no se sabe si los mismos mecanismos de invasividad dependientes de fibroblastos tienen lugar en etapas más tempranas de la transformación de los queratinocitos, cuando se inicia la invasión local, y por lo tanto ha sido el foco de esta investigación. Las células de carcinoma parecen ser el origen de los fibroblastos. Se ha demostrado un papel de la especificidad de órgano de los fibroblastos en la promoción de la invasión de células de carcinoma . Varios estudios han informado que solo un número limitado de células tumorales de origen humano creció en ratones desnudos. Se ha cuestionado la sensibilidad de la prueba de malignidad in vivo para células neoplásicas humanas, especialmente aquellas en etapas tempranas de malignidad , y se han realizado intentos de desarrollar modelos experimentales in vivo funcionalmente confiables de tejidos humanos en ratones humanizando el microambiente de los ratones mediante la adición de fibroblastos humanos antes del xenotrasplante de las células epiteliales humanas, pero la cuestión de las especiesla especificidad no se ha investigado más en parte debido a la falta de modelos experimentales apropiados. El desarrollo posterior de modelos organotípicos heterólogos ha hecho posible tales estudios mediante la construcción de modelos que albergan tipos de células de diferentes especies. En el presente estudio, hemos utilizado tales modelos organotípicos 1) para probar la hipótesis de que la invasión de células epiteliales orales parcialmente transformadasse desencadena por señales proinvasivas difusibles proporcionadas por fibroblastos orales específicos de la especie; 2) investigar si los factores de crecimiento sugeridos por los estudios de cultivo en monocapa como importantes para la invasividad de SCC juegan un papel clave para la invasividad local de queratinocitos orales parcialmente transformados en cultivos tridimensionales organotípicos; y 3) identificar cambios fenotípicos específicos de queratinocitos orales parcialmente transformados asociados con la transición de un comportamiento no invasivo a uno invasivo. Se obtuvieron queratinocitos orales humanos parcialmente transformados de The European Collection of Cell Cultures y se cultivaron rutinariamente en medio de Eagle modificado por Dulbecco suplementado con suero de ternero fetal al 10 %, 20 μg/ml de L-glutamina y 5 μg/ml de hidrocortisona. Se aislaron fibroblastos orales humanos normales primarios a partir de seis biopsias de mucosa bucal humana, después de la extracción quirúrgica de las muelas del juicio como se describió anteriormente. el estudio, aprobado por el Comité de Ética de la Universidad de Bergen, incluyó donantes clínicamente sanos solo después del consentimiento informado. La investigación se realizó en el Departamento de Odontología, Oral