Revista de Inmunología Clínica y Celular
Acceso abierto

abstracto

El factor de crecimiento transformante-β1 antagoniza la señalización favorable a la supervivencia de la interleucina-5 al activar la calpaína-1 en los eosinófilos humanos primarios

Qifa Xie, Zhong-Jian Shen, Jiyoung Oh, Haiyan Chu y James S. Malter

Antecedentes: los eosinófilos rápidamente sufren apoptosis a menos que estén expuestos a citocinas prosupervivencia como la interleucina 5 (IL-5) o el factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF). In vivo, los eosinófilos se exponen a TGF-β 1 que puede inducir apoptosis, lo que sugiere que puede funcionar para contrarrestar los efectos de IL-5 o GM-CSF y limitar la eosinofilia tisular in vivo.
Objetivo: El objetivo de este estudio fue investigar los efectos proapoptóticos de TGF-β solo y en combinación con IL-5 sobre los eosinófilos.
Métodos: Se evaluó la viabilidad de los eosinófilos en sangre periférica (PBEos) mediante citometría de flujo después de la exposición a TGF-β1 e IL-5 . La activación de calpaína-1 se determinó en extractos celulares mediante análisis de transferencia Western de sustratos endógenos y con un sustrato de espectrina fluorógena α. Las interacciones moleculares entre calpaína 1 y calpastatina se evaluaron mediante inmunoprecipitación y transferencia de Western.
Resultados: las concentraciones fisiológicas de TGF-β1 antagonizaron significativamente los efectos prosupervivencia de IL-5. La apoptosis inducida por TGF-β1 fue suprimida por los inhibidores de la calpaína, o su objetivo aguas abajo, la caspasa 3. La señalización de TGF-β1 a través de Smad3 no se vio afectada por la IL-5 y fue necesaria para los efectos proapoptóticos. de TGF-β1. Sin embargo, la fosforilación de Akt inducida por IL-5 fue inhibida por TGF-β1 y se asoció con una escisión acelerada de calpaína y muerte de eosinófilos.
Conclusión: TGF-β1 induce activación de calpaína-1 a través del antagonismo de Akt que induce la activación de caspasa y la apoptosis de eosinófilos.