Revista de Proteómica y Bioinformática
Acceso abierto
ISSN: 0974-276X
ISSN: 0974-276X
Amanda Voros, Johanna De Longchamp y Mazen Saleh
Los micoplasmas han demostrado ser patógenos exitosos a pesar de sus genomas mínimos en algunas especies. Su naturaleza simplista los convierte en una herramienta importante para comprender los genes involucrados en los procesos metabólicos básicos y la patogénesis. De particular interés son los genes implicados en la evasión del micoplasma de las respuestas inmunitarias del huésped y la supervivencia dentro de las células fagocíticas. Las proteínas secretadas por los micoplasmas en el ambiente ácido e hidrolítico de un macrófago pueden ayudar a descubrir importantes factores de virulencia de este grupo de procariotas.
Este estudio examinó el efecto del pH en el secretoma de Mycoplasma capricolum. La bacteria se cultivó en medios libres de proteínas y se investigó el sobrenadante del cultivo en busca de proteínas producidas durante el crecimiento. Se utilizó electroforesis en gel bidimensional seguida de espectrometría de masas MALDI-TOF de digeridos trípticos para identificar las proteínas en esta fracción.
En condiciones ácidas, se visualizaron un total de 111 puntos de proteína del secretoma de M. capricolum mediante tinción con plata. Se detectó un menor número de puntos en el sobrenadante de cultivo neutro (82 puntos). La superposición de los dos mapas 2D reveló 26 proteínas exclusivas del secretoma a pH ácido, pero no fue posible la identificación de todas las manchas. La identificación de proteínas neutras reveló la presencia de 7 lipoproteínas putativas, metaloproteasa de zinc, tres peptidasas, pirofosfatasa inorgánica, nicotinamidasa/pirazinamidasa y proteína ribosómica S4, y varias proteínas hipotéticas. Las proteínas identificadas en el sobrenadante del cultivo ácido incluyeron hemolisina A, péptido metionina sulfóxido reductasa, dos peptidasas, nucleósido quinasa, una lipoproteína y otras. Un ensayo enzimático API ZYM demostró que el espectro de enzimas secretadas a un pH ácido era similar al de un pH neutro, las actividades de la fosfatasa ácida, la fosfohidrolasa, la esterasa lipasa C8 y la fosfatasa alcalina aumentaron. Las tres proteínas clave secretadas prominentes a pH ácido fueron la fosfatasa ácida, la hemolisina y la gelatinasa.