Revista de Atención Farmacéutica y Sistemas de Salud
Acceso abierto
ISSN: 2376-0419
ISSN: 2376-0419
Mohammad A. Obeid
El ARN de interferencia implica la degradación de un ARN mensajero diana mediante la incorporación de ARN de interferencia cortos (siARN) [1]. El ARN de interferencia (ARNi), la herramienta biológica más popular mediante la cual el ARN de doble cadena (dsARN) provoca el silenciamiento de genes al apuntar al ARNm complementario para su degradación, es una gran innovación en el tratamiento terapéutico universal de las enfermedades y transforma la forma en que los investigadores estudian la función de los genes. Ampliando la información sobre los componentes subatómicos de la impedancia del ARN endógeno , los siRNA se han desarrollado como medicamentos corrosivos nucleicos imaginativos para el tratamiento de enfermedades mortales, por ejemplo, crecimientos malignos.
Los pequeños ARN de interferencia (ARNsi) se combinan engañosamente con átomos de ARN abandonados dobles de 19 a 23 nucleótidos de largo . Se utilizan de forma rutinaria en la ciencia subatómica para silenciar transitoriamente la calidad de la intriga. Inspiran la reacción de ARNi después de oficial a su transcripción objetiva dependiendo de la complementariedad de la sucesión. Se han utilizado apropiadamente para contemplar el impacto de diferentes lncRNA oncogénicos a través de la pérdida de capacidad.
El siRNA ha dado nuevas oportunidades a la mejora de la medicación inventiva para tratar de antemano enfermedades graves, por ejemplo, el crecimiento maligno. Es de intensidad natural ya que hace un mal uso de la vía del ARNi endógeno, permite una disminución explícita de las cualidades relacionadas con la enfermedad y es apropiado para cualquier cualidad con una disposición correlativa. Como base del tratamiento de calidad intervenido por ARNsi, la naturaleza hereditaria de la enfermedad ofrece una gran ayuda. A decir verdad, varios siRNA se han diseñado para apuntar a oncogenes predominantes, oncogenes virales asociados con la carcinogénesis u oncogenes mal prácticamente dirigidos.
Mecanismo:
El paso inicial de RNAi incluye el manejo y la escisión de RNA abandonado doble más largo en siRNA, en general con una proyección de 2 nucleótidos en el extremo 3 'de cada hebra. La proteína responsable de este manejo es un catalizador similar a la RNasa III llamado Dicer. Cuando se forman, los siRNA están limitados por un complejo parcial multiproteico denominado RISC (complejo de silenciamiento inducido por ARN). Dentro del complejo RISC, se aíslan las hebras de siRNA y la hebra con el extremo 5' más estable normalmente se incorpora al complejo RISC dinámico. La parte de siRNA de un solo sentido antisentido en ese punto controla y ajusta el complejo RISC en el mRNA objetivo y mediante la actividad de la proteína RISC sinérgica, un individuo de la familia de los argonautas (Ago2), se corta el mRNA .
Métodos:
Los NISV se establecieron mediante una mezcla de microfluidos, que es una técnica desarrollada recientemente que se usa para preparar nanopartículas a base de lípidos y da como resultado la creación de pequeñas vesículas con una ejemplificación efectiva de un operador restaurador. Para preparar NISV, volúmenes explícitos de cada acciónLa disposición de las partes de NISV se combinó para configurar la etapa de lípidos. La etapa de lípidos se infundió en el golfo principal y la etapa de fluidos en la segunda bahía del micromezclador de microfluidos, con la temperatura de mezcla establecida en 50°C. Las proporciones de la tasa de flujo (FRR) entre la etapa acuosa y la natural se establecieron en 3:1 y las tasas de flujo total (TFR) de las dos etapas se establecieron en 12 ml/min. Esto tiene en cuenta la mezcla rápida entre las dos etapas a altas velocidades de flujo ya una temperatura superior al progreso de la etapa de los lípidos. Luego se recogieron las dispersiones de la corriente de salida y se debilitaron rápidamente para disminuir el último contenido de etanol en la planificación a 6,25% (v/v). La evaluación de citotoxicidad de NISV se completó en células malignas de pulmón no pequeñas (A549) y células de melanoma de ratón (B16-F10-LUC). El siRNA que se centra en la proteína fluorescente verde (GFP) en las células copGFP-A549 o la luciferasa en las células B16-F10-LUC se tipificaron en NISV. La restricción de la articulación de GFP contra GFP siRNA (siGFP) transmitida utilizando NISV se evaluó mediante citometría de flujo, respuesta en cadena de la polimerasa y mancha occidental. Se utilizaron ratones BALB/c desnudos vacunados con células B16-F10-LUC que inducen la luciferasa comunicadora de melanoma para evaluar la capacidad del NISV de transmitir ARNip in vivo.
Resultados:
La citotoxicidad considera demostrado que los NISV no fueron dañinos a niveles de 40 µg/ml o inferiores. Las definiciones de NISV tenían una alta eficacia de ejemplificación de siRNA. La lente de aumento fluorescente y la citometría de flujo consideran una captación celular elevada demostrada por las células en contraste con el ARNsi desnudo, que no fue captado por las células. NISV tenía la opción de transmitir siGFP a las células y sofocar por completo la articulación de GFP. Estos resultados se confirmaron transfectando la luciferasa creando células B16-F10-LUCcon siRNA contra luciferasa (siLUC). La estimación del grado de articulación de luciferasa después de las transfecciones siLUC utilizando un marco de medición de proteína de luciferasa exhibió efectivamente el ocultamiento de la articulación de luciferasa. A continuación, se utilizaron NISV en ensayos in vivo utilizando ratones BALB/c desnudos. Después de la infusión intratumoral, se transportó siLUC a las células y sofocó la articulación de la luciferasa a un nivel esencialmente más elevado que los ratones recompensados con siLUC expuesto. Estos resultados in vivo afirman la capacidad de NISV para transportar de forma eficaz el siRNA al citoplasma de las células objetivo y sofocar la proteína objetivo.
Conclusión:
NISV se ha exhibido ampliamente y solo porque posiblemente se pueda utilizar como un marco de transporte para siRNA. Estos resultados han indicado que NISV se puede utilizar para vencer los obstáculos, como la baja estabilidad y la absorción celular deficiente, en la terapia basada en ARNip.