Enfermedades micobacterianas
Acceso abierto
ISSN: 2161-1068
ISSN: 2161-1068
Shumaila N. M. Hanif, Rajaa Al-Attiyah y Abu Salim Mustafa
La expresión natural de los genes de cinco proteínas antigénicas principales presentes en la región genómica de diferencia (RD)1, es decir, pe35, Se determinó ppeE68, esxA y esxB, y RD9, es decir, esxV, a niveles de proteína y ARNm, en M. tuberculosis, M. bovis BCG y especies micobacterianas ambientales de M.avium y M.vaccae. La expresión de ARNm se determinó utilizando ARN micobacteriano total y cebadores directos e inversos específicos de genes en la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa (RT-PCR), y la expresión de proteínas se determinó mediante análisis de inmunotransferencia Western de sonicados micobacterianos con antisueros que contenían anticuerpos específicos de proteínas generados en conejos. Además, la expresión de cada proteína en diversas fracciones subcelulares de M. tuberculosis se estudió mediante análisis de inmunotransferencia Western de paredes celulares, filtrados de cultivo y sonicados de M. tuberculosis utilizando antisueros de conejo. Los resultados mostraron expresiones de ARNm y proteínas para PE35, PPE68, ESXA y ESXB solo en M. tuberculosis, mientras que ESXV se expresó en M.tuberculosis y M.bovis BCG, pero ninguno de ellos se expresó en M.avium y M.vaccae. . Además, todas las proteínas se detectaron en varias fracciones subcelulares de M. tuberculosis. En conclusión, nuestro estudio demuestra que las cinco principales proteínas antigénicas codificadas por genes presentes en las regiones RD1 y RD9 se expresan naturalmente en M.tuberculosis, mientras que solo ESXV se expresa en M. bovis BCG y ninguna de estas proteínas se expresa en la micobacteria ambiental. especies de M. avium y M. vaccae. Como estas proteínas son antígenos mayores reconocidos por las células Th1 de fenotipo protector, podrían ser útiles en el diagnóstico específico y/o desarrollo de nuevas vacunas contra la tuberculosis.