Revista de métodos de diagnóstico médico
Acceso abierto

abstracto

La evolución y la innovación de las pruebas de ADN libre de células derivadas de donantes en trasplantes

Wong L, Scott S, Grskovic M, Dholakia S, Woodward RN

Antecedentes: Se implementaron mejoras en la medición de ADN libre de células derivadas de donantes en el ensayo AlloSure para lograr un tiempo de respuesta más rápido, un flujo de trabajo de laboratorio optimizado, y un límite inferior de detección. La validación analítica estableció las características de desempeño. Se usaron muestras clínicas para demostrar la equivalencia con el ensayo original. Materiales y métodos: AlloSure 3.0 se implementó con una sola preparación de biblioteca múltiplex y secuenciación de lectura única para optimizar el flujo de trabajo y reducir el tiempo de procesamiento. El rendimiento analítico del ensayo se caracterizó según los métodos CLSI. Resultados: el rendimiento de AlloSure 3.0 mejora en relación con el rendimiento del ensayo AlloSure original. El rango notificable es de 0,12 % a 16 % de ADN libre de células derivado de donante (dd-cfDNA). La precisión también ha mejorado, con un coeficiente de variación de ejecución a ejecución del 2,7 %. Tras estas mejoras en el ensayo, establecimos una concordancia del 99 % con la versión original de AlloSure para muestras clínicas. Conclusión: Las mejoras continuas en los métodos de ADN libre de células derivadas de donantes dieron como resultado un rango notificable más amplio, un menor tiempo de respuesta y una mayor precisión, manteniendo la misma precisión que se demostró con el lanzamiento inicial de AlloSure. El rendimiento mejorado permite un mayor rango para la evaluación de los cambios dinámicos que se ha demostrado que informan sobre el rechazo mediado por células T de bajo grado.