Revista de investigación ósea
Acceso abierto

abstracto

El progenitor mieloide-T DN2 (DN2mt) es una célula diana para la transformación leucémica por el oncogén TLX1

Lynnsey A Zweier-Renn, Irene Riz, Teresa S Hawley y Robert G Hawley

Introducción: Activación inapropiada del TLX1 (T- el gen homeobox1) de la leucemia celular por translocación cromosómica es un evento recurrente en la leucemia linfoblástica aguda de células T humanas (T-ALL). La expresión ectópica de TLX1 en células progenitoras de médula ósea murina utilizando un vector retroviral convencional produce líneas celulares inmortalizadas de manera eficiente e induce tumores similares a T-ALL en ratones después de una latencia prolongada.

Métodos: Para eliminar una posible contribución de la mutagénesis por inserción retroviral a la función de inmortalización y transformación de TLX1, incorporamos el gen TLX1 en un vector retroviral autoinactivante aislado.

Resultados: Las células progenitoras de médula ósea murina transducidas retroviralmente que expresan TLX1 tuvieron una ventaja de crecimiento/supervivencia y fácilmente dieron lugar a líneas celulares inmortalizadas. La caracterización extensa de 15 líneas celulares recién establecidas no logró revelar un sitio de integración retroviral común. Este análisis integral amplía en gran medida nuestro estudio anterior que involucraba un número limitado de líneas celulares, lo que brinda apoyo adicional para la opinión de que la expresión constitutiva de TLX1 es suficiente para iniciar la serie de eventos que culminan en la inmortalización de células progenitoras hematopoyéticas. Cuando las células inmortalizadas con TLX1 se cocultivaron en monocapas de OP9-DL1 en condiciones que permitían la diferenciación de células T, se reveló un potencial de linaje T latente. Sin embargo, las células no pudieron transitar el paso de compromiso DN2 mieloide-T (DN2mt)-DN2 T-linaje determinado (DN2t). El bloqueo de diferenciación coincidió con la falta de regulación positiva del gen del factor de transcripción de dedo de zinc Bcl11b, cuyo ortólogo humano demostró ser un objetivo transcripcional directo de TLX1 regulado negativamente en la línea celular TLX1+ T-ALL ALL-SIL . Otros estudios han descrito la capacidad de TLX1 para promover la omisión de la detención del punto de control mitótico, lo que lleva a la aneuploidía. También encontramos que las células diploides DN2mt que expresan TLX1 tratadas con el inhibidor mitótico paclitaxel pasaron por alto el punto de control mitótico y mostraron inestabilidad cromosómica. Esto se asoció con una expresión elevada de los objetivos transcripcionales de TLX1 involucrados en la replicación del ADN y la mitosis, incluidos Ccna2 (ciclina A2), Ccnb1 (ciclina B1), Ccnb2 (ciclina B2) y Top2a (topoisomerasa II). En particular, la expresión forzada de BCL11B en células ALL-SIL T-ALL confirió resistencia a la topoisomerasa IIα; veneno etopósido.

Conclusión: Tomados junto con hallazgos previos, los datos refuerzan un mecanismo de actividad oncogénica de TLX1 vinculado a la inestabilidad cromosómica resultante de la expresión desregulada de genes diana involucrados en procesos mitóticos. Especulamos que la represión de la expresión de BCL11B puede proporcionar parte de la explicación de la observación de que el contenido de ADN aneuploide en las células T leucémicas TLX1+ no presagia necesariamente un pronóstico desfavorable. Este ensayo de inmortalización de células progenitoras hematopoyéticas TLX1/diferenciación de células T debería ayudar a comprender mejor los mecanismos de la evolución a malignidad mediada por TLX1 y tiene el potencial de ser un predictor útil de la respuesta de la enfermedad a nuevos agentes terapéuticos en TLX1+ T-ALL.< /p>