Revista de ciencia y terapia celular
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abstracto

La gelsolina autóloga combinada con nucleótidos exógenos mejora la diferenciación condrogénica en el estroma mesenquimatoso derivado del tejido adiposo equino Células: una investigación in vitro

Krzysztof Marycz, Monika Maredziak, Agnieszka Smieszek, Jakub Grzesiak y Anna Siudzinska

Antecedentes: Hoy en día, la práctica veterinaria implica el tratamiento de trastornos asociados con la degeneración del cartílago mediante terapias avanzadas, basadas en la aplicación de células estromales mesenquimales. La preparación de células para el trasplante requiere cultivo in vitro y evaluación de su potencial condrogénico.

Propósito: determinar si la gelsolina autóloga derivada del suero equino y los nucleótidos exógenos pueden mejorar la actividad metabólica y la diferenciación condrogénica de las células estromales mesenquimales derivadas de tejido adiposo equino (EqASC).

Métodos: Se aislaron células madre mesenquimales de tejido graso subcutáneo equino. El medio de cultivo estándar se complementó con gelsolina al 1% o/y 0,1 mg/ml de nucleótidos. La actividad de proliferación de las células se determinó basándose en los resultados obtenidos con el ensayo citotóxico y el análisis del desprendimiento de microvesículas. La morfología, la actividad citofisiológica y el potencial de diferenciación condrogénica se evaluaron utilizando microscopía de luz, fluorescente y electrónica de barrido. Los efectos de la estimulación condrogénica se determinaron mediante (i) análisis de la expresión génica para el citoesqueleto y las proteínas de la matriz; (ii) histoquímica de proteoglicanos y (iii) análisis del patrón de crecimiento del cultivo y formación de condronódulos.

Resultados: La mejora de la actividad de proliferación se observó en cultivos estimulados con nucleótidos exógenos. Aunque la adición de gelsolina no afectó la proliferación de EqASC, contribuyó a la integridad del citoesqueleto. Ambos investigaron factores que influyeron positivamente en la diferenciación condrogénica – gelsolina a través de la estabilización de la expresión de proteínas del citoesqueleto, mientras que los nucleótidos promueven la formación de nódulos. La combinación de gelsolina y nucleótidos mejoró la proliferación celular, lo que se reflejó en una mayor actividad celular y el desprendimiento de microvesículas e influyó en la formación de nódulos condro.

Conclusiones: La gelsolina autóloga y los nucleótidos exógenos implementados en los cultivos in vitro de células madre estromales mesenquimales aisladas de tejido adiposo pueden mejorar la integridad celular, la proliferación y la diferenciación condrogénica de esas células, por lo que podrían influir directamente en potencial regenerativo de los trasplantes de células madre estromales mesenquimales derivadas de tejido adiposo utilizados para el tratamiento de la osteoartritis equina.