Revista de Síndromes Genéticos y Terapia Génica
Acceso abierto

abstracto

La supresión dirigida de un pseudoexón de distrofina usando oligonucleótidos antisentido

Barrett LW, Fletcher S, Barreo RA, Bellgard MI, Flanigan KM, Wong B y Wilton SD

La omisión de exón inducida por oligonucleótidos antisentido se muestra muy prometedora como terapia potencial para restaurar la expresión funcional de distrofina en la distrofia muscular de Duchenne. La redirección del procesamiento del ARNm puede extirpar uno o más exones que flanquean las deleciones o duplicaciones de cambio de marco para que se restaure el marco de lectura y se induzca una transcripción similar a la distrofia muscular de Becker. Aquí, informamos la aplicación de la omisión de exón para extirpar un pseudoexón de 72 pb que causa la enfermedad del ARNm maduro de la distrofina. Este pseudo-exón surge de un solo cambio de base T>G en el intrón 47 que crea un sitio aceptor con una puntuación de sitio de empalme de consenso fuerte. Aunque en marco, este pseudo-exón contiene varios codones de terminación y su inclusión es consistente con un diagnóstico de distrofia muscular de Duchenne. El paciente de 21 años ya no puede caminar, pero puede pararse y sentarse sin ayuda, lo que indica que el procesamiento de premRNA con fugas y la generación de algunas transcripciones normales ha retrasado hasta cierto punto la atrofia muscular. En los casos en que la lesión de DMD activa uno o más sitios de empalme crípticos y da como resultado la retención de secuencias intrónicas en ese ARNm maduro, la omisión de exón tiene el potencial de generar una transcripción de gen normal. Los oligonucleótidos antisentido dirigidos al sitio de empalme mutante pudieron eliminar el pseudoexón del transcrito maduro y restaurar la expresión de distrofina de longitud completa. Esto contrasta con la mayoría de las estrategias de omisión de exón para la distrofia muscular de Duchenne en las que se utilizan oligonucleótidos antisentido para restaurar la expresión, pero la transcripción similar a la distrofia muscular de Becker inducida es más corta y potencialmente menos funcional que el ARNm de longitud completa. Como tal, los pseudoexones pueden ser particularmente susceptibles a la omisión de exón, especialmente cuando los niveles basales de expresión han elevado los niveles de distrofina endógena, lo que reduce la gravedad de la enfermedad y debería mitigar las respuestas inmunitarias a la isoforma normal inducida.