Revista de glucómica y lipidómica
Acceso abierto
ISSN: 2153-0637
ISSN: 2153-0637
Syed Qaiser Shah
En esta investigación, el ditiocarbamato de rifabutina (RFND) se marcó con tecnecio-99m (99mTc) utilizando la técnica del tricarbonilo. El RFND marcado se caracterizó además en términos de pureza radioquímica, estabilidad en solución salina y suero, unión bacteriana in vitro, biodistribución en ratas modelo animal y precisión gammagráfica en conejo modelo animal. Finalmente, se compararon diferentes características radiobiológicas del 99mTc(CO)3-RFND con el 99mTc-RFN informado recientemente. Se observó que la forma de ditiocarbamato de RFN mostró mejor pureza radioquímica, estabilidad en solución salina, unión bacteriana, biodistribución e imágenes dirigidas que el 99mTc-RFN informado recientemente. Estos mejores parámetros radiobiológicos posicionaron al 99mTc(CO)3-RFND como un agente más confiable para la tuberculosisformación de imágenes En el siglo pasado, uno de los mayores logros de los científicos es el desarrollo de vacunas y antibióticos que eliminaron o controlaron en mayor medida la mayoría de las enfermedades infecciosas. Además de estos tremendos logros en el diagnóstico y tratamiento de enfermedades infecciosas, la infección sigue siendo el foco de atención de los investigadores e incluso en estos días se cree que la infección es la principal causa de morbilidad.y mortalidad. Debido al avance en la patología clínica, las enfermedades infecciosas pueden detectarse a través de pruebas de laboratorio simples y tratarse con éxito con los medicamentos apropiados. Sin embargo, se observa que una fracción importante de esas infecciones con resultado de muerte podría deberse a condiciones complicadas de detectar en sus primeras etapas. La detección temprana ya tiempo en tales situaciones podría ayudar en el tratamiento adecuado y, por lo tanto, disminuir las posibilidades de muerte. La tecnología gammagráfica de medicina nuclear (NMST) proporciona una alternativa diferente para la localización de sospechas de infección bacteriana debido a su mayor sensibilidad. En caso de infección de tejidos profundos, infección ósea, infecciones agudas que amenazan la vida y que requieren un tratamiento temprano adecuadopor ejemplo, apendicitis, infecciones crónicas graves que se producen debido a la resistencia a los medicamentos; e infecciones oportunistas en personas inmunocomprometidas, se podría aprovechar la NMST. Tales canteras como si la infección está presente o no y su sitio, gravedad y causa potencial podrían responderse mediante el uso de NMST. Sin embargo, para responder a estas canteras con precisión, el requisito previo es un radiofármaco fiable que pueda acumularse en el lugar de la infección. El radiofármaco destinado a la gammagrafía debe responder a las canteras antes mencionadas, pero no debe ser tóxico, mostrar mayor captación en las áreas objetivo, baja dosis y bajo costo y fácil disponibilidad. Los agentes denunciados y sus derivados han mostrado proporciones prometedoras de diana específica (área infecciosa) a no diana (área no infecciosa) en sus primeras etapas, además de un comportamiento circulatorio y excretor normal. Sin embargo, la aparición de bacterias resistentes a múltiples fármacos como Mycobacterium tuberculosis (MBT), es una seria amenaza para que los médicos detecten y manejen tales infecciones en sus primeras etapas. En este esquema, se examinó el marcaje de ditiocarbamato de rifabutina (RFND) con 99m Tc utilizando la técnica del tricarbonilo. La viabilidad del procedimiento de marcaje de tricarbonilo se basa en el H 2 O pobremente adherido al 99m Tc(OH 2 ) 3 (CO) 3 ] + precursor que se puede sustituir fácilmente. El RFND marcado se caracterizó además en términos de pureza radioquímica, estabilidad en solución salina y suero, unión bacteriana in vitro, biodistribución en ratas modelo animal y precisión gammagráfica en conejo modelo animal. Finalmente se compararon diferentes características radiobiológicas del 99m Tc(CO) 3 -RFND con el 99m Tc-RFN informado recientemente. La rifabutina (RFN) se obtuvo de Chengdu Yuyang High-Tech Developing Co., Ltd. China, y todos los productos químicos y solventes de Sigma. En este trabajo se utilizaron HPLC de Shimadzu, contador de pozos de Ludlum, calibrador de dosis de Capintech y cámara gamma de Nuclearmedizine. La rifabutina (RFN) se derivatizó a ditiocarbamato de rifabutina (RFND) utilizando el método informado anteriormente.28 . Brevemente, se mezclaron 0,002 mol de RFND y 2,4 mg de NaOH en un vial esterilizado limpio. A continuación, se añadieron 22 ml de tetrahidrofurano (THF) al vial de reacción seguido de agitación durante 30 min en un baño de hielo. Luego, 2 ml de disulfuro de carbono (CS 2) y se dejó el vial de reacción durante 8 h en un baño de hielo para agitación continua. Después de eso, la mezcla se procesó para agitación continua hasta 12 h a temperatura ambiente, seguido de recuperación mediante recristalización. El RFND se caracterizó por técnicas espectroscópicas avanzadas. Síntesis de 99mTc(CO)3-RFND y pureza radioquímica Se mezcló 1 mCi (0,2 ml) de pertecnetato de sodio con 2 mg (disueltos en 0,4 ml de solución salina normal) de RFND seguido de ajuste de pH (pH 10) utilizando 0,1 mol/L de HCL en un vial esterilizado lleno de gas nitrógeno limpio. Posteriormente, la mezcla se transfirió a un kit Isolink seguido de incubación para un etiquetado óptimo a 25 °C durante 15 min. Se utilizó cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) para caracterizar 99m Tc(CO) 3-RFND en términos de pureza radioquímica por el método informado anteriormente. Brevemente, se administraron 10 µl de 99m Tc(CO) 3 -RFND al sistema de HPLC equipado con un detector de UV que funciona a 254 y un contador de centelleo de flujo, una columna C-18 y una bomba binaria. A continuación, durante 15 min, a un caudal de 1 ml/min se eluyó la columna con agua y metanol (P:M). El efluente se recogió en viales separados y luego se contó la actividad. Absorción de Mycobacterium Tuberculosis (MBT) La absorción de MBT de 99m Tc(CO) 3 -RFND se evaluó adoptando el método informado anteriormente. Brevemente, 0,8 ml de ácido acético (0,01 M) que contiene aproximadamente 1 x 10 8 Se incubaron unidades formadoras de colonias (UFC) de MBT y 0,2 ml de tampón de fosfato de sodio a 4 °C durante 60 min. La mezcla se centrifugó a 1500 rpm durante 15 min y después de eliminar el sobrenadante se volvió a centrifugar después de suspender en 1,5 mL de tampón de fosfato de sodio. Posteriormente, se eliminó de nuevo el sobrenadante y se contó la actividad de los sedimentos bacterianos. El porcentaje de captación in vivo de 99m Tc(CO) 3 -RFND se evaluó en ratas modelo animales sanas e infectadas artificialmente. El animal se dividió en dos grupos, es decir, A y B. Para los animales del grupo A, aproximadamente 1 x 10 8Unidades formadoras de colonias (UFC) en 0,2 ml de solución salina MBT se inyectaron por vía intramuscular en la pierna izquierda de la rata Sprague-Dawley anestesiada (rango de peso, 200–250 g) para crear infección. Después de ocho horas, se inyectó una cantidad equimolar de aceite estéril en la pata derecha de la misma rata para crear inflamación, seguido de la administración intravenosa de 0,5 mCi de 99m Tc(CO) 3- RFND. A los animales del grupo B, se repitió el proceso anterior sin administración de MBT. Posteriormente, las ratas se sacrificaron a diferentes intervalos después de la inyección intravenosa de radiofármaco según el procedimiento de la Autoridad Reguladora Nuclear de Pakistán (PNRA), Comité de Ética, Comisión de Energía Atómica de Pakistán (PAEC). A partir de entonces, el % de captación in vivo del 99m Tc(CO) 3-RFND en un gramo de sangre, bazo, estómago, intestino, riñón, músculo infectado, músculo inflamado y normal se midió utilizando un contador gamma. Formación de imágenes con 99mTc(CO)3-RFND Se utilizaron conejos sanos (peso: 3,0 a 4,0 kg) en la evaluación del perfil de formación de imágenes del radiofármaco instantáneo. Se inyectaron 0,5 mL de MBT que contenían 1 x 10 8 UFC en la pata izquierda del conejo sano y después de 08 h, en la pata derecha del mismo conejo se inyectaron 0,5 mL de aceite estéril. Finalmente, el conejo se colocó boca arriba sobre el lecho de la gammacámara seguido de una inyección intravenosa de 2 mCi 99m Tc(CO) 3 -RFND. Las imágenes de cuerpo entero se adquirieron utilizando un colimador de propósito general de baja energía (LEGP) a diferentes intervalos.