Revista de Inmunología Clínica y Celular
Acceso abierto

abstracto

Pruebas cruzadas basadas en fase sólida utilizando la plataforma Luminex para aloinjertos de órganos sólidos: más regresión que progreso en comparación con el procedimiento de precursores basado en ELISA

Daniela Bau, Gary Sawers, Anja Wahle, Wolfgang Altermann y Gerald Schlaf

Los anticuerpos dirigidos contra los antígenos HLA de un donante determinado representan el más destacado causa de rechazo hiperagudo y agudo. Para seleccionar receptores sin anticuerpos específicos del donante, se estableció primero la prueba cruzada de citotoxicidad dependiente del complemento (CDC-), que representa el procedimiento estándar hasta el presente. Su resultado negativo previo al trasplante se considera actualmente como el requisito más importante para una supervivencia exitosa del injerto renal a corto plazo. Sin embargo, como ensayo funcional, depende en gran medida de la disponibilidad de linfocitos de donantes aislados y, en particular, de su vitalidad. Además, durante los últimos diez años, se han discutido cada vez más varias desventajas del procedimiento basado en los CDC con respecto a la alta susceptibilidad de este ensayo a factores disruptivos que con frecuencia conducen a resultados falsos positivos. En este contexto, se ha demostrado que varias enfermedades autoinmunes, especialmente del tipo de complejos inmunes (tipo III) o el tratamiento farmacológico de un receptor dado, conducen a inesperados “falsos positivos” resultados de la prueba cruzada de CDC. Como alternativas metódicas para la prueba cruzada específica de anticuerpos anti-HLA, se establecieron dos procedimientos basados en ELISA i) el Sistema de Monitoreo de Anticuerpos (AMS-) ELISA y ii) AbCross-ELISA en nuestro laboratorio de tipificación de tejidos y en los de algunos otros grupos. Ambos sistemas, sin embargo, fueron descontinuados por meras razones comerciales en los años 2013 y 2016, respectivamente. Utilizando el mismo conjunto de anticuerpos de diagnóstico, el AMS-ELISA, ahora denominado Donor-Specific Antibodies/DSA, se volvió a fabricar posteriormente como una matriz basada en microesferas utilizando la plataforma Luminex. Con el fin de establecer el ensayo DSA como el único sistema de pruebas cruzadas basado en fase sólida disponible comercialmente, este procedimiento se evaluó sistemáticamente en nuestro laboratorio. Principalmente, pero no exclusivamente, debido a los inconvenientes del software de evaluación, sin embargo, 69 (32,5 %) de los resultados de pruebas cruzadas definidos virtualmente (n = 212 especificaciones independientes anti-HLA de clase I y II y sus correspondientes ensayos DSA, respectivamente) se clasificaron como divergentes utilizando el ensayo DSA, mientras que solo 143 resultados (67,5 %) se clasificaron como conformes con el software de este ensayo. Refiriéndose a la cohorte de destinatarios elegida (n=106), no menos de 62 (58,4%) de ellos se caracterizan por hallazgos que no están respaldados por pruebas cruzadas virtuales. Aquí proporcionamos evidencia de que, por varias razones, los resultados proporcionados por el ensayo DSA, en contraste con los del AMS-ELISA como su sistema precursor, deben ser cuestionados de manera crítica. Por lo tanto, concluimos que se requieren modificaciones urgentes por parte del fabricante para conducir nuevamente a un sistema de suficiente validez utilizable para los diagnósticos de rutina de cualquier laboratorio.