Revista de glucómica y lipidómica
Acceso abierto

abstracto

Clasificación específica del sitio de los oligosacáridos ligados a N de las regiones extracelulares del receptor IIIb de FcÎó expresados en células renales de crías de hámster

Koichi Kato

Fc&gamma humano; El receptor III (FcγRIII) consta de dos isoformas que están codificadas por dos genes individuales: transmembrana FcγRIIIa y FcγRIIIb unido a glicosilfosfatidilinositol. Ambas isoformas pueden existir como una forma soluble (sFcγRIII), que se compone de su región extracelular producida por escisión proteolítica. Las funciones inmunológicas mediadas por FcγRIII tales como la citotoxicidad y la fagocitosis mediadas por células dependientes de anticuerpos dependen críticamente de la N-glicosilación de las moléculas de FcγRIII. En nuestro estudio anterior, los perfiles basados en cromatografía líquida de alta resolución indicaron que los oligosacáridos ligados a N liberados del alelo NA2 de sFcγRIIIb humano expresados en células renales de hámster bebé están compuestos de oligosacáridos de tipo alto en manosa y complejos fucosilados en el núcleo. tipo oligosacáridos. Aquí clasificamos con éxito los N-glicanos de esta glicoproteína en estos dos tipos en cada uno de los seis sitios de N-glicosilación mediante análisis de espectrometría de masas en tándem de electropulverización de cromatografía líquida (LC) combinado con tratamientos de endoglicosidasa. Nuestros resultados indicaron que cuatro sitios de sFcγRIIIb, Asn38, Asn74, Asn162 y Asn169, expresaron solo oligosacáridos de tipo complejo, mientras que los dos sitios restantes, Asn45 y Asn64 (ambos no están conservados en el alelo NA1), estaban ocupados por no solo oligosacáridos de tipo complejo sino también oligosacáridos de tipo alto en manosa, que se cree que están involucrados en la interacción de FcγRIIIb con el receptor del complemento tipo 3. Junto con el perfil de N-glicosilación específico del sitio informado previamente de sFcγRIIIa recombinante, este estudio subraya que tanto sFcγRIIIa como sFcγRIIIb producidos en diferentes vehículos de producción expresan oligosacáridos de tipo complejo fucosilados en el núcleo como las glicoformas principales en Asn74 y Asn162. Estos hallazgos brindan información sobre el diseño y el desarrollo de anticuerpos terapéuticos porque el N-glicano Asn162 contribuye significativamente a la unión de la inmunoglobulina G.