Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Separación y análisis de nucleótidos de mono-di- y trifosfato del extracto celular mediante HPLC de fase reversa

Praveen Kusumanchi, Rachel Rogers, Ting Zhang, Suthat Liangpunsakul, Zhihong Yang, Hiremagalur N Jayaram

El enfoque del presente estudio fue desarrollar un líquido de alto rendimiento de fase reversa de par de iones simple, confiable y altamente sensible cromatografía para la separación y cuantificación de nucleótidos de purina, pirimidina y piridina. Primero, optimizamos las condiciones de la columna para lograr la separación y cuantificación de la línea de base de 15 nucleótidos. La cantidad mínima requerida para detectar todos los ribonucleótidos con reproducibilidad y alta precisión fue de 10 pmol. Las curvas de calibración para todos los estándares de nucleótidos fueron lineales dentro del rango de 10 a 200 pmol. Este método se puede utilizar con éxito para cuantificar todos los nucleótidos simultáneamente en estudios con inhibidores de nucleótidos como tiazofurina y benzamida ribósido en líneas celulares de cáncer. Este es el primer informe que muestra la separación de los 15 nucleótidos en una sola inyección