Journal of Fertilization: In Vitro - IVF-Worldwide, Reproductive Medicine, Genetics & Stem Cell Biol
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abstracto

Evaluación semicuantitativa de superóxido en el eyaculado puro humano mediante un ensayo basado en tetrazoilo azul nitro: una comparación de enfoques de análisis visual, espectrofotométrico y de imagen

Moisés de la Casa, José; Luis Fernández, Vicente Badajoz, Carmen López-Fernández, Stephen D Jonhston and Jaime Gosálvez

Propósito: Evaluar la eficacia de tres métodos colorimétricos para detectar la presencia de superóxido (SOx) en el eyaculado humano puro basados en la transformación de nitro azul tetrazolio (NBT) en formazán.

Métodos: El color resultante después de hacer reaccionar 230 muestras de semen puro durante 30 minutos después de la eyaculación se evaluó semicuantitativamente y los resultados se compararon usando (1) una evaluación visual simple, (2) espectrofotometría y ( 3) una metodología de análisis de imágenes basada en imágenes digitales escaneadas directamente.

Resultados: Después de comparar la clasificación visual con los valores espectrofotométricos y el análisis de imágenes, el 8 % y el 6 % de los casos estaban mal clasificados, respectivamente. Sin embargo, la correlación de Pearson calculada entre los valores obtenidos mediante evaluaciones visuales versus espectrofotométricas o de análisis de imágenes fue extremadamente alta (P = 0,000). La correlación más fuerte se observó cuando se compararon los datos espectrofotométricos y de análisis de imágenes.

Conclusión: La evaluación del color producida después de hacer reaccionar la NBT con muestras de esperma puro puede usarse como metodología semicuantitativa para la asignación no subjetiva de la presencia de SOx en el humano puro. eyacular. Las metodologías aquí probadas, permiten la discriminación entre eyaculados, con un margen de error entre las diferentes metodologías inferior al 10%, independientemente de si la evaluación se realiza de forma visual, espectrofotométrica o mediante análisis de imágenes.