Biología celular y del desarrollo
Acceso abierto
ISSN: 2168-9296
ISSN: 2168-9296
Alyssa G. Schuck, Weisburg JH, Greenbaum RE, Golfeiz MD, Segal JR, Weiss RA, Liebman EC, Zuckerbraun HL y Babich H
Se evaluó la toxicidad del extracto de semilla de uva (GSE), un nutracéutico rico en polifenol proantocianidinas, para determinar su toxicidad para las células orales humanas. Utilizando el ensayo de citotoxicidad de rojo neutro, se demostró que las células de carcinoma escamoso humano (HSC-2) son más sensibles a GSE que los fibroblastos gingivales. Los polifenoles sufren reacciones de autooxidación en medio de cultivo celular, para generar especies reactivas de oxígeno, en particular, peróxido de hidrógeno. Usando el ensayo FOX para cuantificar el peróxido de hidrógeno, GSE, cuando se agregó al medio de cultivo celular, generó peróxido de hidrógeno, aunque a niveles relativamente bajos. No se detectó peróxido de hidrógeno en presencia de catalasa, que cataliza la descomposición del peróxido de hidrógeno, y se detectaron niveles menores en presencia de superóxido dismutasa, que estabiliza los polifenoles. El radical libre superóxido, detectado con nitroazul de tetrazolio, se identificó en medio modificado con GSE. Centrándose en las células de carcinoma HSC-2, la toxicidad de 24 horas de GSE no se vio afectada por los secuestrantes de peróxido de hidrógeno, la catalasa y el piruvato, lo que indica que el peróxido de hidrógeno no jugó ningún papel en la toxicidad. Para las células HSC-2 cotratadas con GSE y D,L-butionina-[S,R]-sulfoximina, un agotador del glutatión intracelular, no se produjo potenciación de la toxicidad. Durante el rango de toxicidad de 24 horas, GSE no afectó el nivel de glutatión intracelular; sin embargo, ocurrió algo de agotamiento, pero solo a concentraciones elevadas de GSE. La toxicidad de GSE, aparentemente, fue independiente del estrés oxidativo. La citotoxicidad de 24 horas de GSE para las células HSC-2 se potenció en presencia de SOD, lo que indica que las proantocianidinas per se, en lugar de sus productos de autooxidación, representaron la toxicidad. Para confirmar la inestabilidad de GSE en el medio de cultivo celular con una disminución concomitante de la potencia, los estudios compararon el medio recién enmendado con GSE con medio "gastado". medio, es decir, medio modificado con GSE que se dejó en la incubadora durante 24 horas antes de su uso. La potencia de GSE frente a las células HSC-2 se redujo significativamente después de incubarlas en células "gastadas". medio durante 24 horas.