Revista de Proteómica y Bioinformática
Acceso abierto

abstracto

Análisis secretómico de la línea celular de plexo coroideo de ratón ECPC-4 usando Electroforesis en gel bidimensional acoplada a espectrometría de masas

Masaoki Takano, Mari Uramoto, Mieko Otani, Kenji Matsuura, Keiji Sano y Shogo Matsuyama

El plexo coroideo (CP), el principal sitio de producción de líquido cefalorraquídeo (LCR), es responsable de los mediadores inflamatorios involucrados en la meningitis y los sistemas inmunitarios. Se sabe que la línea celular de plexo coroideo de ratón ECPC-4 es útil para el análisis de las funciones de CP. En este estudio, realizamos el análisis del secretoma de ECPC-4 mediante electroforesis en gel bidimensional (2-DE) seguida de espectrometría de masas. Se identificaron veintidós proteínas secretadas en el medio acondicionado de ECPC-4. Eran una proteína secretada ácida y rica en cisteína (SPARC), el inhibidor del activador del plasminógeno 1 (PAI-1) y otros (vinculina, proteína de choque térmico afín de 71 kDa, moesina, tubulina ß2A, fascin, calreticulina, gamma actina, alcohol deshidrogenasa, malato deshidrogenasa, inhibidor alfa de la disociación de Rho GDP, fosfogliceratomutasa 1, proteína tumoral controlada traduccionalmente, proteína de unión a fosfatidiletanolamina1, peroxirredoxina1 tipo II, peroxirredoxina1, polipéptido ligero de miosina 6, cofilina-1, nucleósido difosfato quinasa A, peptidil-prolilcis- trans isomerasa A[PPI-A] y galectina1). Estas proteínas podrían clasificarse como grupos de citoesqueleto/filamento intermedio, plegamiento de proteínas, transducción de señales, crecimiento celular, metabolismo y regulación redox, lo que sugiere que podrían estar relacionadas con las funciones de CP. Además, el nivel de cuatro proteínas cambió en el medio acondicionado de ECPC-4 tratado con lipidA. La subunidad alfa tipo-1 del proteosoma y el nucleósido difosfato quinasa A aumentaron significativamente y la actina gamma y la galectina-1 disminuyeron significativamente, en comparación con las del medio acondicionado de ECPC-4 no tratado. Además, Western Blot también validó los cambios en la subunidad alfa tipo 1 del proteasoma, galectina-1 y nucleósido difosfato quinasa A. Por lo tanto, se sugiere que estas proteínas juegan un papel importante en la inflamación como la meningitis. ECPC-4, como las células epiteliales de CP, es útil para analizar las funciones de CP.