Pañuelo Kumari
El genoma de Mycobacterium tuberculosis codifica varias proteínas hipotéticas que deben caracterizarse. El gen rv2037c se marcó como hipotético y se conservó solo en cepas patógenas de micobacterias, mientras que estuvo ausente en M. smegmatis no patógena. La expresión génica aumentó 25 y 4 veces bajo estrés ácido y nutritivo, respectivamente, en M. tuberculosis H37Ra. En un intento por caracterizar funcionalmente a Rv2037c, el gen se clonó, expresó y purificó a partir de E. coli. La proteína demostró actividad lipolítica con pNP-decanoato como sustrato preferido con un pH óptimo de 8,0 y una temperatura de 40 °C. Además, la proteína demostró actividad de fosfolipasa. Los sitios activos previstos para la proteína se confirmaron mediante mutagénesis dirigida al sitio seguida de un ensayo enzimático para determinar la pérdida de actividad. Para comprender el efecto de este gen en la fisiología de Mycobacterium, el gen se clonó y expresó en M. smegmatis, un huésped sustituto. La expresión de rv2037c en M. smegmatis (MS_Rv2037c) alteró la morfología de las colonias y las características de la superficie celular, como una mayor formación de biopelículas y películas en comparación con el control (MS_vec). MS_Rv2037c disminuyó la permeabilidad de la pared celular, mejoró el contenido de TDM y la resistencia contra diversas tensiones y antibióticos. MS_Rv2037c demostró una mejor infección y capacidad de supervivencia intracelular en células macrófagas THP-I infectadas. Rv2037c indujo la producción de citocinas proinflamatorias TNF-α; e IL-12 en infectados
ratones, lo que sugiere su papel en la modulación inmune. La proteína recombinante también generó una respuesta humoral en pacientes con EPTB y MDR-TB. Los resultados indicaron claramente el papel crucial de esta enzima en la modulación de la pared celular, la infección y la supervivencia intracelular de las micobacterias