Medicina Traslacional
Acceso abierto
ISSN: 2161-1025
ISSN: 2161-1025
Gomes A*, Biswas AK, Bhowmik T, Saha PP y Gomes A
El presente estudio fue un esfuerzo para establecer la actividad anticancerígena de la toxina proteica purificada (drCT-II) del veneno de la víbora de Indian Russell (Daboia russelli russelli) en una línea celular leucémica y un modelo animal. El aislamiento y la purificación de drCT-II se realizaron mediante cromatografía de intercambio iónico de CM-celulosa y RP-HPLC. Se realizó el peso molecular de SDS-PAGE y la secuencia de los primeros 20 aminoácidos de drCT-II. La actividad antileucémica utilizando la línea celular U937 y K562 se estableció mediante citotoxicidad, apoptosis, estudio del ciclo celular, morfología, proteínas marcadoras de cáncer. Se estableció el tiempo medio de supervivencia de ratones albinos macho inducidos con EAC. Se realizó citotoxicidad de linfocitos humanos. drCT-II se eluyó con NaCl 0,1 M en cromatografía de intercambio iónico de CM-celulosa. En RP-HPLC, drCT-II produjo un pico único con un tiempo de retención de 14,6 min. Se encontró que el peso molecular de SDS-PAGE era 6,6 KDa y se encontró que la primera secuencia de 20 aminoácidos era LQXNKLVPIASKTXPPGKNL. drCT-II produjo inhibición del crecimiento celular dependiente del tiempo y la dosis (U937 y K562). Se encontró que la CI50 era de 35,5 µg/ml para células U937 y de 48,2 µg/ml para células K562. drCT-II produjo la interrupción de la membrana, la formación de ampollas y la desintegración nuclear en las células U937 y K562 observadas mediante microscopía electrónica de barrido y confocal. Exhibió fragmentación de ADN y formación de cometas en células leucémicas. drCT-II produjo apoptosis, detención del ciclo celular en la fase G1 y aumentó la expresión de P21, P27 y P53. La apoptosis inducida por drCT-II en células leucémicas se siguió a través de la activación de las vías de las caspasas 3 y 9. DrCT-II inhibió significativamente el crecimiento de células EAC en ratones albinos macho, lo que aumentó el tiempo medio de supervivencia. drCT-II redujo significativamente el recuento de linfocitos humanos (en cultivo). Se puede concluir que drCT-II, una proteína de 6,6 KDa purificada a partir del veneno de Daboia russelli russelli, sería un nuevo agente proapoptótico que induciría la destrucción de células cancerosas a través de la vía p53 y caspasa.