Journal of Fertilization: In Vitro - IVF-Worldwide, Reproductive Medicine, Genetics & Stem Cell Biol
Acceso abierto

abstracto

Enrutamiento de biomoléculas y vectores de transgenes en núcleos de ovocitos

Marek Malecki y Bianca Malecki

La arquitectura molecular de los complejos de poros nucleares (NPC), así como la importación y exportación de moléculas a través de ellos, se ha estudiado intensamente en una variedad de células, incluidos los ovocitos. Sin embargo, las estructuras y los mecanismos implicados en el transporte de moléculas más allá de los NPC no estaban claros hasta ahora. El objetivo específico de este trabajo fue, por tanto, determinar si existen estructuras intranucleares en continuo con los NPC. Esta información podría ayudar a explicar los mecanismos que impulsan la distribución de biomoléculas y vectores dentro de los núcleos celulares.

Para lograr este objetivo, utilizamos la crioinmovilización rápida para capturar los procesos moleculares de las células vivas con una resolución de milisegundos. Buscamos imágenes moleculares, incluida la espectroscopia de pérdida de energía de electrones y la espectroscopia de rayos X de dispersión de energía, para revelar estructuras con resolución espacial nanométrica. También realizamos bioingeniería de fragmentos variables de cadena única para rastrear biomoléculas y transgenes’ construcciones.

Aquí revelamos las redes de enrutamiento nuclear (NRN) en los ovocitos de Xenopus laevis. Las NRN se originan y se extienden desde la parte superior de las canastas intranucleares de los NPC para interconectarlos, mientras crean una arquitectura tridimensional intranuclear compleja. Las NRN guían la exportación tanto de tRNA como de los vectores equipados con señal de exportación nuclear (NES), desde los núcleos. Además, las NRN guían la importación tanto de nucleoplasmina como de los transgenes modificados con señales de localización nuclear (NLS)’ vectores, en los núcleos. Los vectores equipados con estos NLS y NES van y vienen a través de los NPC y NRN.

Para resumir, revelamos la NRN, que funciona como el sistema de distribución guiada en los ovocitos de Xenopus laevis’ núcleos Continuamos con la identificación de sus componentes moleculares.