Espectrometría de masas y técnicas de purificación
Acceso abierto
ISSN: 2469-9861
ISSN: 2469-9861
Arabinda Saha, Ajay Kumar, Sanjay Jagannath Gurule, Arshad Khuroo y Pratika Srivastava
Se desarrolló un método LC-MS/MS para la estimación simultánea de valaciclovir y aciclovir en plasma humano. La muestra de plasma se extrajo con la técnica de extracción en fase sólida y las condiciones cromatográficas se establecieron con columna Inertsil CN-3 (5 μm) y fase móvil (tampón acetato de amonio 1 mM - metanol, 50:50 v/v). Valaciclovir, aciclovir, valaciclovir D4 y aciclovir D4 se detectaron con polaridad positiva en modo de monitorización de reacciones múltiples en transiciones de masa (m/z) 325,2→152,1, 226,2→152,1, 329,3→152,1 y 230,2→152,1, respectivamente. El rango de la curva de calibración validada para valaciclovir es de 4,09 a 725,63 ng/mL y para aciclovir es de 50,35 a 10017,29 ng/mL. Durante el desarrollo del método, no se pudo establecer la estabilidad del aciclovir en sangre completa durante el período de 2 h, ya que la relación KWB/P para el aciclovir es mayor que 1 y aunque para el valaciclovir es menor que 1. Por lo tanto, la distribución de fármacos del aciclovir fue investigado en sangre total y plasma. Los datos experimentales mostraron una caída inicial del nivel de aciclovir en plasma debido a la captación celular de aciclovir por parte de los eritrocitos. Por lo tanto, se permitió que las muestras de comparación enriquecidas alcanzaran el equilibrio (entre RBC y plasma). Después de alcanzar el tiempo de equilibrio (30,0 min), se recogió el plasma de la sangre entera enriquecida y se procesó según el protocolo propuesto. A partir de los datos de estabilidad en sangre, concluimos que tanto el valaciclovir como el aciclovir son estables en sangre durante 2 h. El método desarrollado se validó según las pautas regulatorias actuales y se aplicó para el estudio de bioequivalencia de valaciclovir y aciclovir.