Espectrometría de masas y técnicas de purificación
Acceso abierto

abstracto

Revalidación de un nuevo método LCMS/MS simple, altamente sensible y desarrollado para la estimación de rohitukina y su aplicación en ADME/farmacocinética preclínica

Amarinder Singh, Priya Wazir, Pankaj Chibber, Nitika Kapoor, Amit Kumar, Utpal Nandi, Sumit G Gandhi, Surjeet Singh, Manoj Kumar Tikoo, Ram Vishwakarma y Gurdarshan Singh

El propósito de la investigación fue desarrollar un método simple, rápido, preciso, reproducible y sensible método de cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS) para la determinación de Rohitukine, un alcaloide de cromona en plasma. La separación cromatográfica se logró con una columna Chromolith RP18e de alta resolución (100 × 4,6 mm, 2 μm) empleando una composición isocrática de solvente orgánico acetonitrilo con 0,1% (v/v) de ácido fórmico (80:20, %v/v) a una caudal de 0,5 ml/min. Espectrometría de masas de triple cuadrupolo con técnica de ionización por electropulverización positiva (ESI) que opera en la monitorización de reacciones múltiples utilizada para estimar transiciones iónicas MS/MS como 306,05>245,10 y 306,05>231,05 para Rohitukine y 330,30>97,0 para IS. Se usó el método de precipitado de proteína simple de un solo paso para la preparación de la muestra. El método se validó en cuanto a especificidad, linealidad, exactitud, precisión, recuperación, efecto de matriz y estabilidad según las directrices de la FDA. La linealidad del analito se adquirió en todo el rango de concentración de 0,1 ng/mL a 1000 ng/mL en plasma de ratones. El estudio farmacocinético se realizó en ratones hembra BALB/c por vía oral (20 mg/kg) e intravenosa (2 mg/kg) donde la biodisponibilidad oral de Rohitukine obtenida fue del 84%. El método bioanalítico se utilizó con éxito para la determinación del estudio de unión a proteínas plasmáticas, la permeabilidad y la estabilidad microsomal en microsomas hepáticos de ratones, ratas y humanos.