Ingeniería enzimática
Acceso abierto

abstracto

Reutilización de ciclodextrina glicosiltransferasa mediante inmovilización en portadores magnéticos

Kate Cristina Blanco, Francisco José; dos Santos, Natalia Sozza Bernardi, Miguel Jafelicci Júnior, Rubens Monti and Jonas Contiero

La CGTasa de Bacillus lehensis aislada de aguas residuales de un molino de harina de yuca en el estado de São Paulo, Brasil, fue inmovilizada después de ser parcialmente purificada mediante precipitación con sulfato de amonio. La CGTasa parcialmente purificada se inmovilizó por unión covalente sobre un soporte de magnetita, que se silanizó con 3-aminopropiltrimetoxisilano y se activó con glutaraldehído, dando como resultado un rendimiento del 16,27 % y una actividad final del 17,54 % de la actividad inicial. Se determinaron las propiedades fisicoquímicas y la cinética de la ciclodextrina glicosiltransferasa de Bacillus lehensis. La temperatura óptima de la CGTasa inmovilizada fue mayor que la de la enzima soluble (70°C y 55°C, respectivamente). El pH óptimo de la enzima inmovilizada fue el mismo que el de la enzima soluble (pH 8,0). En los ensayos de pH y termoestabilidad, el 50% de la actividad enzimática se mantuvo después de 24 h y el 26,22% de la actividad inicial se mantuvo después de 160 min, respectivamente. La constante de Michaelis-Menten fue de 0,82 mg.ml-1 y la velocidad máxima fue de 45,45 mol.ml-1.min-1. En el estudio de reutilización de la enzima inmovilizada tras cuatro ciclos se mantuvo el 16,66% de la actividad catalítica inicial, demostrando la capacidad de recuperar y reutilizar la enzima inmovilizada sobre magnetita.