Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Mecanismo de retención en la cromatografía líquida de interacción hidrofílica Nuevos conocimientos revelados a partir de la combinación de datos cromatográficos y de dinámica molecular

Fabrice Gritti

El mecanismo de retención de analitos polares/cargados en la cromatografía líquida de interacción hidrofílica (HILIC) sigue siendo ambiguo a partir de la sola medición de su retención factores Es porque las propiedades termodinámicas solo se relacionan con la relación de equilibrio entre la concentración en la fase móvil y la de la fase estacionaria. No proporcionan información sobre su distribución microscópica en el volumen del mesoporo. Los cromatógrafos no pueden concluir sin ambigüedades si los analitos se adsorben en la superficie de los adsorbentes HILIC, se reparten entre la capa interfacial a granel y rica en agua o si tanto los mecanismos de adsorción como los de partición participan en el mecanismo de retención. Para resolver esta ambigüedad, se propone combinar datos cromatográficos (factor de retención, exclusión de tamaño inverso, difusividad de la muestra a lo largo del lecho) con datos de dinámica molecular (DM). Estos últimos proporcionan información microscópica sobre la estructura del eluyente y la movilidad promedio del analito a través del mesoporo. Esto permite 1) la delimitación clara entre tres regiones de poros: la capa de agua rígida adsorbida sobre la superficie sólida, la capa de agua difusa interfacial y la región a granel, 2) la medición de las constantes de equilibrio de adsorción y reparto del analito entre estas tres regiones de poros, y 3) la distribución de la concentración del analito en el volumen de poros. Los beneficios de este nuevo enfoque se demuestran para un adsorbente HILIC de retención débil (partículas de sílice híbridas orgánicas/inorgánicas de 3,5 µm) en contacto con mezclas ternarias de eluyentes (acetonitrilo/agua pH 5/tercer solvente, 90/5/5, v/ v/v). El tercer solvente tiene varias polaridades desde agua hasta n-hexano. Los resultados muestran que, a pesar de tener factores de retención casi idénticos, el proceso de retención de la nortriptilina está esencialmente controlado por un mecanismo de partición, mientras que el de la citosina está gobernado por un mecanismo de adsorción. Por el lado de la aplicación, se muestra cómo aumentar significativamente la retención de muestras en HILIC agregando un tercer solvente en la fase móvil.