Revista de Hematología y Enfermedades Tromboembólicas
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abstracto

La restauración de la expresión de PRG2 por 5-azacitidina implica la sensibilidad de las células de leucemia mieloide aguda positivas para FLT3-ITD resistentes a PKC-412 (midestaurina)

Hamid Ali Nagi Al-jamal, Siti Asmaa Mat Jusoh, Mohamad Ros Sidek, Rosline Hassan y Muhammad Farid Johan

Antecedentes: Genes supresores de tumores Genes supresores de tumores ( TSG) se inactivan por metilación en varios tipos de cáncer, incluida la leucemia mieloide aguda (LMA). El silenciamiento transcripcional del gen PRG2 podría estar involucrado en el desarrollo y la progresión de los cánceres. La 5-azacitidina (5-Aza) es un inhibidor de la ADN metiltransferasa que provoca la desmetilación del ADN, lo que da como resultado la reexpresión de TSG silenciado. La midostaurina (PKC412) es un inhibidor de la tirosina quinasa de objetivos múltiples que inhibe de forma potente la tirosina quinasa FLT3 e induce la remisión hematológica en pacientes con LMA. Sin embargo, la mayoría de los pacientes con AML en ensayos clínicos desarrollaron resistencia a PKC412.

Métodos: Se desarrollaron células resistentes por sobreexposición de células MV4-11 a PKC-412 y se trataron con 5-Aza. La apoptosis y la citotoxicidad de PKC-412 se determinaron utilizando ensayos de anexina V y MTS, respectivamente. El perfil de expresión génica se realizó mediante microarray seguido de PCR cuantitativa en tiempo real. La actividad de STAT se examinó mediante transferencia de Western y la metilación de PRG2 se estudió mediante análisis de pirosecuenciación.

Resultados: La dosis citotóxica de PKC-412 en células resistentes fue significativamente mayor que en células parentales y MV4-11Rpkc+5-Aza (p=0,003). Las células resistentes mostraron una viabilidad significativamente mayor y células apoptóticas más bajas en comparación con otras células (p<0,001). La expresión de PRG2 fue más de 300 veces mayor en las células MV4-11R-pkc+5-Aza en comparación con las células parentales y resistentes (p=0,001). STAT3 se activó en células resistentes. La metilación del gen PRG2 disminuyó significativamente en las células MV4-11R-pkc+5-Aza.

Conclusión: La restauración de la expresión de PRG2 induce sensibilidad hacia PKC-412 y un aumento de la muerte celular. Nuestros hallazgos sugieren que el gen PRG2 podría desempeñar un papel en la sensibilidad a PKC-412 y servir como objetivo para el tratamiento de pacientes con AML resistentes al inhibidor de la tirosina quinasa PKC-412.