Revista de métodos de diagnóstico médico
Acceso abierto

abstracto

Tinte azul reactivo: Aspectos destacados de las vacuolas en el esperma humano

Satoru Kaneko*, Yuki Okada, Satoshi Yokota, Kiyoshi Takamatsu

Objetivos: El manual de referencia de andrología de la OMS considera el contorno de la cabeza del espermatozoide como un parámetro clave para evaluar la infertilidad masculina y clasifica las vacuolas internas como defectos de la cabeza Las características de las vacuolas fueron heterogéneas tanto entre individuos como entre espermatozoides. El presente estudio informó algunas propiedades únicas de Reactive Blue 2 (RB2). El tinte exhibió una especificidad celular dependiente del pH para el esperma humano y la espermátida.

Materiales y métodos: Se tiñeron esperma y espermátide humanos con RB2 a pH 10,0.

Resultados: RB2 tiñó espermatozoides humanos y espermátidas, que aparecieron como cuerpos azulados translúcidos, pero no tiñeron linfocitos, mientras que las vacuolas internas aparecieron como manchas sin tono. La tinción con RB2 también reveló espermátides degradadas que habían sufrido protaminación pero que fueron detenidas antes de la elongación de la cola. La mayoría de las muestras de semen azoospérmico (16/23 casos) incluían espermatozoides o espermátidas degradadas. Aunque las características del contorno de la cabeza y las vacuolas eran heterogéneas entre individuos, la tinción con RB2 en presencia de 2,0 mmol/L de ditiotreitol reformuló universalmente el contorno en una forma ovalada y condujo a la desaparición de las vacuolas, independientemente de sus características originales.

Conclusión: Tres residuos de sulfato en RB2 interactuaron selectivamente con residuos de guanidilo en Arg de protaminas a pH 10. La especificidad celular se debió al contenido de Arg de las nucleoproteínas. RB2 reveló el contorno de la cabeza y las vacuolas internas de los espermatozoides y detuvo las espermátides que habían sufrido protaminación. La falla local del entrecruzamiento de disulfuro podría jugar un papel crítico en la formación de vacuolas. La tinción con RB2 abrió nuevos métodos para explorar la espermiogénesis.