Inmunoterapia: Acceso Abierto
Acceso abierto

abstracto

La mutación R354X en PRPF31 afecta su capacidad de respuesta inflamatoria y empalme

Xiaoqiang Xiao* Colmillo Deng, Shaofen Huang

El factor de procesamiento 31 de pre-ARNm (PRPF31) es un componente clave del empalme de ARN y un gen causante de la enfermedad de la retinosis pigmentaria (RP). Anteriormente, encontramos que la mutación sin sentido R354X en PRPF31 induce RP en una familia china de RP. Con el fin de investigar los mecanismos moleculares subyacentes de la patogenia de la RP inducida por esta mutación, generamos líneas celulares que expresan establemente el mutante R354X, el tipo salvaje (WT) de PRPF31 y el vector vacío correspondiente usando células HEK293T, las líneas celulares resultantes se usaron para Long non- secuenciación del ARN codificante (secuenciación LncRNA). Los resultados de la secuenciación de LncRNA mostraron que, en comparación con WT, la mutación R354X cambió la expresión y el empalme de las transcripciones codificantes y no codificantes. Curiosamente, en las células HEK293T y APRE-19, los genes asociados a la inflamación como IFI6, OAS3 y STAT3 mejoraron su expresión en respuesta a la sobreexpresión de WT PRPF31; sin embargo, en las células con mutación R354X, la expresión de esos genes se mantuvo en niveles basales. Además, se encontró una mayor expresión de H2AFX y una capacidad de crecimiento atenuada en células que expresan R354X PRPF31 en HEK293T. En contraste con WT, el mutante R354X mostró un modelo de empalme variado en Di Hydro Folate Reductase (DHFR) en HEK293T. Durante el análisis IP, encontramos que el mutante R354X redujo su unión con los ARNm de CPSF1 y SORBS1 en ARPE-19, y su unión con CTNNBL1 también interfirió en las células ARPE-19. Por otro lado, el mutante R354X también aumentó el nivel de lectura de las transcripciones. En conjunto, la mutación R354X en PRPF31 afectó la supervivencia celular, cambió la expresión génica y el empalme. Esos hallazgos indican que la inflamación y la oxidación podrían contribuir a la patogenia de la RP inducida por la mutación R354X.