Andrología-Acceso Abierto
Acceso abierto

abstracto

Análisis cuantitativo de gonadotropinas y tirotropina en muestras de suero por espectrometría de masas LC-MRM

Anna Illiano, Chiara Melchiorre, Carlo Cioci, Gabriella Pinto, Francesca Di Rella, Alessandro Conforti, Luigi Carbone, Angela Amoresano

Las gonadotropinas, como la hormona estimulante del folículo (FSH) y la hormona luteinizante (LH), pertenecen a una familia de hormonas glicoproteicas junto con gonadotropina corinica placentaria humana (hCG) y estimulantes de la tiroides hormona (TSH). LH y FSH son reguladores clave de la reproducción y actúan de manera endocrina para regular esteroidogénesis y gametogénesis en ovario y testículo. Hoy en día, las formulaciones altamente purificadas y recombinantes de las gonadotropinas se usan comúnmente en el tratamiento del hipogonadismo y la infertilidad. Por lo tanto, la precisa la medición y caracterización de las gonadotropinas séricas es esencial para monitorear la respuesta hormonal del paciente tratamiento, pero su cuantificación absoluta es un gran desafío debido a su gran heterogeneidad, y su muy bajas concentraciones en suero. El método de referencia para cuantificar las gonadotropinas circulantes, el ligado a enzimas ensayo inmunoabsorbente (ELISA), está limitado por la disponibilidad de anticuerpos de alta calidad para cada candidato a biomarcador ya la especificidad de la afinidad antígeno-anticuerpo.

El objetivo de este estudio fue establecer una alternativa válida a los inmunoensayos comunes, basada en la masa en tándem espectrometría en modo iónico de monitorización de reacción múltiple (MRM), para cuantificar gonadotropinas (LH y FSH) y TSH en suero. El método desarrollado permite la identificación y cuantificación de proteínas diana mediante el seguimiento 3 péptidos prototípicos específicos (ion precursor) y de 3 a 5 mejores fragmentos (ion producto) para cada hormona, y se aplicó con éxito al análisis de sueros de una pequeña cohorte de mujeres. Los resultados muestran una sensibilidad comparable a los ensayos ELISA, con la ventaja de ser más rápidos y selectivos. Además, este método podría ser fácilmente implementado con otras proteínas séricas de interés ahorrando tiempo y costo en análisis de rutina.