Revista de Proteómica y Bioinformática
Acceso abierto

abstracto

Caracterización proteómica de dos cepas de Mycoplasma mycoides Subsp. Mycoides de patogenicidad diferente

Ivanka Krasteva, Neil F Inglis, Flavio Sacchini, Robin Nicholas, Roger Ayling, Colin P Churchward, John March, Alex Lainson, Kevin Mclean, Val Hughes, Lisa Imrie, Erin Manson, Jason Clark, Attilio Pini y David GE Smith

Mycoplasma mycoides subsp mycoides (Mmm) es un importante patógeno del ganado bovino que causa pleuroneumonía bovina contagiosa (CBPP), una enfermedad grave y frecuentemente mortal que está muy extendida en los países subtropicales. A pesar del reconocimiento como patógeno en el siglo XIX y los avances logrados a través de la secuenciación del genoma y la biología sintética, muchas de las características moleculares de Mmm siguen estando pobremente caracterizadas. Usando un enfoque de proteómica, este estudio tuvo como objetivo definir los principales determinantes de proteínas Mmm, incluidas las proteínas de membrana superficial y las involucradas en la colonización y patogenicidad del huésped. Para este propósito, se analizaron y compararon células enteras y una fracción de membrana enriquecida con Triton X-114 de una cepa de campo africana altamente patógena (N6) y una cepa vacunal (KH3J) utilizando metodologías basadas en gel, es decir, 2-DGE y SDS-PAGE en combinación. con MALDI-MS/MS y LC-ESI-MS/MS.

Se identificó un total de 318 proteínas (alrededor del 31 % del proteoma predicho), que incluyen lipoproteínas, prolipoproteínas y proteínas hipotéticas con ubicaciones de membrana predichas y posibles roles en la patogenicidad. Ciento cuarenta y cinco de estas proteínas, con diferentes ubicaciones y funciones subcelulares predichas pero que también incluyen proteínas no caracterizadas, no se han informado previamente como expresadas por Mmm. Se detectaron muchas más proteínas mediante LC-ESI-MS/MS (n=315) que mediante 2-DGE y MALDI-MS (n=52); sin embargo, solo se detectaron 3 proteínas con el último enfoque.

Se observó que la mayoría de las proteínas eran comunes a ambas cepas, aunque se detectó un número considerable de proteínas exclusivamente en una sola cepa, lo que podría tener implicaciones para la aptitud y la patogenicidad. Hasta donde sabemos, este estudio representa la caracterización proteómica más extensa de Mmm hasta la fecha y ha identificado características sobre las cuales basar futuros estudios de la fisiología y patogenicidad de este procariota.