ISSN: 0974-276X
Annika Thorsell, Jonas Faijerson, Fredrik Blomstrand, Michael Nilsson, Kaj Blennow, Peter S Eriksson y Ann Westman-Brinkmalm
El desarrollo de estrategias que permitan la identificación de factores secretados en medios acondicionados es importante para una amplia gama de áreas de investigación. Los factores secretados están involucrados en la comunicación intercelular y también podrían ser biomarcadores de importancia clínica potencial, utilizados para la detección temprana y el diagnóstico de enfermedades. El objetivo de este estudio fue investigar si el marcaje metabólico combinado con la espectrometría de masas podría usarse para identificar proteínas secretadas en un medio acondicionado que contiene suero. Se han realizado estudios proteómicos anteriores de medios acondicionados en células cultivadas en medios sin suero. En el presente estudio se aprovechó el hecho de que sólo las proteínas derivadas de las células contienen el aminoácido marcado isotópicamente incorporado, lo que permite diferenciar las proteínas liberadas de las proteínas del medio. El segundo objetivo era examinar si se podían encontrar diferencias cuantitativas en los perfiles de secreción entre los astrocitos primarios y los astrocitos en un modelo de astrogliosis reactiva con lesión por rasguño. Hasta donde sabemos, este es el primer estudio que identifica proteínas secretadas en un medio que contiene suero utilizando un enfoque proteómico que involucra el etiquetado de isótopos estables por medio de aminoácidos en cultivos celulares y espectrometría de masas.