Revista de glucómica y lipidómica
Acceso abierto

abstracto

El perfil comparativo de glicanos dirigido a la podocalixina revela una diferencia entre las células madre embrionarias humanas y las células de carcinoma embrionario

Yoko Itakura, Atsushi Kuno, Masashi Toyoda, Akihiro Umezawa y Jun Hirabayashi

Antecedentes: Las células madre embrionarias humanas (hESC) y las células de carcinoma embrionario humano (hECC) han utilizado para la investigación con células madre. Aunque se sabe que estas células comparten muchas propiedades, incluida una alta capacidad de desarrollo y antígenos de superficie celular, sus orígenes son básicamente diferentes: las hECS se derivan de la masa celular interna de los blastocistos, mientras que las hECC provienen de tumores malignos. Por lo tanto, la falta de un buen método para diferenciar estas células pluripotentes sigue siendo un problema crítico para diagnosticar el potencial tumorigénico de las células madre pluripotentes para sus aplicaciones médicas. En este contexto, el desarrollo de marcadores específicos para distinguir las hESC de las hECC también tiene valor clínico.

Método: En este estudio, centramos nuestro análisis de glucanos en una glicoproteína rica en carbohidratos, la podocalixina, conocida como portadora de los antígenos TRA-1-60 y TRA-1-81, que representan Marcadores de glucano hESC. La glicoproteína diana semicuantificada mediante inmunotransferencia se enriqueció a partir de los extractos celulares mediante inmunoprecipitación, y las diferencias de glicosilación que se produjeron entre hESC y hECC se analizaron sistemáticamente mediante una tecnología avanzada de micromatrices de lectina, perfilado de lectina con superposición de anticuerpos (ALP). También se analizaron perfiles de cuerpos embrionarios humanos (hEB) diferenciados de hESC.

Resultados y conclusión: El perfil de glucano de la podocalixina de las hECC fue significativamente diferente al de las hESC. Las señales de lectina correspondientes al ácido siálico unido a α2-6 se elevaron en los hECC, y las digestiones con glicosidasa revelaron además una diferencia significativa en las estructuras penúltima y terminal no reductora. Estos resultados demuestran que el presente procedimiento centrado en una glicoproteína particular podría mejorar diferencias relativamente pequeñas pero significativas entre células estrechamente relacionadas como hESC y hECC a nivel de glucoma. El presente hallazgo será útil para desarrollar un método de diagnóstico para distinguir las células madre indiferenciadas de las diferenciadas utilizadas para la terapia regenerativa.