Ingeniería enzimática
Acceso abierto

abstracto

Oligomerización catalizada por papaína en medios orgánicos acuosos monofásicos - Síntesis y caracterización de oligómeros de aminoácidos neutros y polares

Srinivasan SK, Kapila S, Daniel F y Nam 

La síntesis de oligopéptidos generalmente se lleva a cabo en medios de reacción acuosos o bifásicos; el uso de medios de reacción monofásicos es bastante limitado. En este estudio, se sintetizaron homo-oligopéptidos de lisina (Lys), glicina (Gly), metionina (Met) y tirosina (Tyr) a través de una reacción catalizada por papaína en sistemas monofásicos que consisten en acetonitrilo/agua. Las condiciones de reacción se optimizaron para la formación de enlaces peptídicos y para minimizar la desnaturalización de la enzima. Dichos medios son especialmente atractivos porque pueden minimizar la hidrólisis secundaria e inversa del complejo de acilo y el oligopéptido, respectivamente. Los oligopéptidos sintetizados se purificaron y caracterizaron mediante cromatografía líquida de fase inversa (RPLC) y espectrometría de masas de ionización por electropulverización (ESI-MS). Los rendimientos de oligopéptidos fueron aproximadamente del 80% para todos los aminoácidos. También se investigó la estereoespecificidad de la papaína en medios de acetonitrilo/agua. Los enantiómeros de metionina separados se caracterizaron usando cromatografía líquida de alta presión quiral (HPLC). Los resultados indican que la especificidad L de la papaína se mantiene en medios monofásicos.