Revista de Horticultura
Acceso abierto

abstracto

Optimización del análisis de electroforesis en gel bidimensional de brotes de col china (Brassica rapa L. Ssp. Pekinensis)

Xue Zhou, Ruiqin Ji, Zhiyong Liu y Hui Feng

Con el fin de establecer un protocolo adecuado y eficaz para el análisis de electroforesis en gel bidimensional (2-DE) de los yemas de Brassica rapa L. ssp. Pekinensis, se extrajeron proteínas enteras de cogollos fértiles de la línea A/B AB01 mediante tres métodos diferentes (método de tris-acetona-fenol, método de precipitación con trizol, método de precipitación con acetona-TCA). Además, se optimizaron cuatro aspectos del sistema 2-DE, incluido el protocolo IEF, la concentración de gel SDS-PAGE, el rango de pH de las tiras de IPG y el volumen de muestra de proteína. Los resultados muestran que el método de precipitación con TCA-acetona es el método más efectivo para la extracción de proteína completa y un sistema 2-DE optimizado que usa el protocolo IEF de 20 000 Vh, tiras de IPG de pH 4-7, concentración de gel SDS-PAGE al 12 % y proteína Los volúmenes de muestra de 250 µg son adecuados para el análisis 2-DE de proteína de yemas fértiles en col china. Estos resultados pueden utilizarse para facilitar los estudios proteómicos de la esterilidad masculina génica en Brassica rapa L. ssp. Pekinensis.