ISSN: 2471-9315
Pintubala Kshetri, Oscar Ningombam y Debananda S. Ningthoujam
Objetivo: Aislamiento de bacterias alcalófilas productoras de proteasa alcalina y optimización de la producción de proteasa en medio de bajo costo.
Métodos: La optimización de la producción de proteasa se realizó mediante un enfoque de una variable a la vez (OVAAT) y enfoques estadísticos utilizando el software Design Expert 6.
Resultados: Se aislaron nueve (9) cepas bacterianas alcalófilas morfológicamente distintas. De estos aislados, se encontró que 6 cepas eran positivas para la producción de proteasa. Entre estas cepas proteolíticas, Bacillus sp. KW2 fue seleccionado para estudios de optimización de la producción de proteasas. La producción óptima de proteasa se observó a 30°C y pH 10,7. Entre las diversas fuentes de carbono y nitrógeno estudiadas, se encontró que el salvado de arroz y la harina de soja son las mejores fuentes de carbono y nitrógeno, respectivamente. Se usó el diseño de Plackett-Burman (PBD) para seleccionar los factores de señal que influyeron en la producción de proteasa. El salvado de arroz, la harina de soja, la edad del inóculo, el CaCl2 y el tamaño del inóculo dieron efectos positivos mientras que KH2PO4 y MgSO4< /sub> dio efectos negativos sobre la producción de proteasa. Los cuatro factores más críticos a saber. El salvado de arroz, la harina de soja, el cloruro de calcio y el dihidrógeno fosfato de potasio fueron seleccionados para estudios de optimización mediante la Metodología de superficie de respuesta (RSM). Los gráficos de superficie de respuesta mostraron interacciones significativas entre los factores y se obtuvo un medio final optimizado (FOM) después de los experimentos de PBD y RSM. En general, se observó un aumento de 4,8 veces en la producción de proteasa después de la optimización. Estudios del curso temporal de la producción de proteasas por Bacillus sp. KW2 reveló que la máxima producción de proteasa se producía en la fase estacionaria (84 h) de crecimiento.
Conclusiones: El presente estudio muestra que la producción de proteasa está muy influenciada por las condiciones culturales y los constituyentes de los medios. Este estudio también estableció que la cepa KW2 podría producir proteasa alcalina en un medio de bajo costo que contiene salvado de arroz y harina de soja como fuentes principales de carbono y nitrógeno. KW2 y su proteasa pueden ser agentes prometedores para aplicaciones biotecnológicas.